自己細胞を用いた心臓再生への挑戦

使用自体细胞对心脏再生的挑战

• 批准号: 22K19521
• 负责人: 柴 祐司
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19521/
• 关键词: iPS細胞

１）カニクイザルiPS細胞由来心筋細胞の作製とレシピエントカニクイザルの同定フィリピン産カニクイザル5頭から、皮膚組織由来線維芽細胞に対して、エピゾーマルベクターを用いてOct3/4、Sox2、Klf4、L-Mycを遺伝子導入することによりiPS細胞を5系統作製した。未分化iPS細胞に対して、アクチビンA、BMP４を加えることにより、レシピエト1頭当たり2×10^8個の心筋細胞を3頭分作製し、凍結保存した。またレシピエントカニクイザルについて、MHC型同定を行い、15頭確保した。２）霊長類前臨床移植試験レシピエント動物に対して、全身麻酔下で開胸し、左冠動脈前下行枝中部で血流を遮断し、3時間後に再灌流することにより心筋梗塞モデル（ischemia/reperfusion injury）を作製する。心筋梗塞作製12週間後の慢性期に、自家移植（N=2）を行った。4週間後の組織解析では、グラフト心筋に対する炎症細胞浸潤が見られた。自己細胞移植においても、一定程度免疫応答が誘発されることが示され、少量の免疫抑制剤を併用して移植試験を再開することとした。

1)食蟹猴iPS细胞来源的心肌细胞的产生和受体食蟹猴Oct3/4、Sox2、Klf4、L-的鉴定通过导入Myc基因产生了5个iPS细胞系。通过将激活素 A 和 BMP4 添加到未分化的 iPS 细胞中，为三只动物的每个受体生成 2 x 10^8 心肌细胞并冷冻保存。我们还鉴定了受体食蟹猴的 MHC 类型，并确定了 15 只猴子。 2) 灵长类动物临床前移植研究 受体动物进行心肌梗塞模型（缺血/再灌注损伤）。自体移植（N=2）在心肌梗死后12周的慢性期进行。 4周后的组织分析显示移植心肌中有炎症细胞浸润。结果表明，自体细胞移植也会诱导一定程度的免疫反应，因此我们决定使用少量免疫抑制剂重新开始移植研究。