Physiological roles of cell wall-localized cytokinin ribosidase

细胞壁定位的细胞分裂素核糖苷酶的生理作用

基本信息

批准号：
22KF0164
负责人：
榊原均
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KF0164/
关键词：
サイトカイニンシロイヌナズナアポプラスト

项目摘要

2021年度に確立したシロイヌナズナCKR遺伝子（At5g18860）のT-DNA挿入系統（２系統）をMGRL寒天培地上および土耕栽培で生育させ経時的に成長様式の観察を行った。その結果、野生型と比べ目視で確認できる大きな差異はなかった。このことは本研究グループが先行して行っているイネのCKR遺伝子（CPN1）の機能欠失型変異体の成長表現型と同様であった。また、この変異体および野生株に活性型サイトカイニン（トランスゼアチン）とリボシド型前駆体（トランスゼアチンリボシド）を投与した際のサイトカイニン誘導遺伝子マーカー遺伝子（A-タイプ　レスポンスレギュレーター遺伝子）の発現誘導度合いを定量的に比較するための実験条件（処理濃度と処理時間）の検討を行った。さらにCKRの発現部位を調べるためにCKR遺伝子上流のプロモータ領域をレポーター遺伝子（GUS）に連結させたコンストラクトを作成した。CKR酵素タンパク質の生化学的特徴づけについては、メチロトローフ酵母Pichia pastoris内で発現系をpPICZaプラスミドを用いて構築、エレクトロポレーション法で導入し形質転換体を得た。

将2021年建立的拟南芥CKR基因（At5g18860）的T-DNA插入系（2系）在MGRL琼脂培养基和土壤培养物中生长，并观察随时间推移的生长模式。结果，与野生型相比，没有可以目视确认的重大差异。这与我们研究组之前进行的水稻CKR基因（CPN1）功能丧失突变体的生长表型相似。另外，当向该突变株和野生型菌株施用活性细胞分裂素（反式玉米素）和核苷型前体（反式玉米素核糖苷）时，细胞分裂素诱导的标记基因（A型反应调节基因）的表达被诱导。我们研究了实验条件（处理浓度和处理时间）以定量比较处理程度。此外，为了研究CKR的表达位点，构建了CKR基因上游的启动子区域与报告基因(GUS)连接的构建体。为了对CKR酶蛋白进行生化表征，使用pPICZa质粒在甲基营养酵母毕赤酵母中构建表达系统，并通过电穿孔获得转化子。

项目成果

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专利数量（0）

Systemic Regulation of Iron Acquisition by Arabidopsis in Environments with Heterogeneous Iron Distributions

铁分布不均匀的环境中拟南芥对铁获取的系统调控

DOI：
10.1093/pcp/pcac049
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Ryo Tabata; Takehiro Kamiya; Shunpei Imoto; Hana Tamura; Michika Tabata; Tasuku Hirayama; Hironaka Tsukagoshi; Keitaro Tanoi; Takamasa Suzuki; Takushi Hachiya; Hitoshi Sakakibara
通讯作者：
Hitoshi Sakakibara

植物成長制御におけるサイトカイニン生合成と作用調節機構の研究

细胞分裂素生物合成及其在植物生长调控中的调控机制研究