歯根膜コラーゲンのプロテオスタシス制御に基づく新規歯周治療法の開発

基于牙周膜胶原蛋白稳态控制的牙周治疗新方法的开发

基本信息

批准号：
22K09979
负责人：
中村友美
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

歯根膜は細胞外基質タンパクを大量に産生しており、とりわけコラーゲンの生合成が活発な組織である。細胞内のタンパク恒常性を維持するためには、その合成と分解のみならず、立体構造の安定化（フォールディング）による量や質の管理が不可欠である。加齢により環境ストレスが蓄積した歯根膜では、分解系のひとつであるオートファジーやフォールディングの異常が推察されるが、その詳細は不明である。本研究では、コラーゲン特異的なシャペロン分子（HSP47）に着目し、加齢が歯根膜細胞のコラーゲンタンパクのプロテオスタシスに及ぼす影響を検討した。申請者はこれまでの研究により、歯根膜におけるオートファジーの異常がコラーゲン代謝に影響を及ぼし、硬組織形成に関係することを報告している。本研究において、2022年度は、ヒト歯根膜細胞のHSPsならびにHSP47活性が成熟コラーゲンの産生と変性コラーゲンの蓄積に及ぼす影響を、各種のHSPsの誘導剤あるいは阻害剤、HSP47のsiRNAを用いて検討した。HSPs活性がヒト歯根膜細胞の成熟コラーゲンの産生に及ぼす影響を検討するために、ELISA法を用いた解析を行った。また、HSPs活性の低下がヒト歯根膜細胞のコラーゲン代謝に及ぼす影響を検討するために、蛍光プローブCollagen Hybridizing Peptide(CHP)を用いて変性コラーゲンを標識し、共焦点顕微鏡観察で評価した。

牙周膜产生大量的细胞外基质蛋白，是胶原蛋白生物合成特别活跃的组织。为了维持细胞内蛋白质稳态，不仅需要合成和降解蛋白质，还需要通过稳定其三级结构（折叠）来控制其数量和质量。在因老化而累积环境压力的牙周膜中，作为分解系统之一的自噬和折叠被怀疑存在异常，但详细情况尚不清楚。在这项研究中，我们重点关注胶原蛋白特异性伴侣分子（HSP47），并研究衰老对牙周膜细胞中胶原蛋白蛋白质稳态的影响。通过前期研究，申请人报道牙周膜自噬异常影响胶原蛋白代谢，并与硬组织形成相关。在2022年的这项研究中，我们使用各种HSP诱导剂或抑制剂以及HSP47 siRNA，研究了人类牙周膜细胞中HSP和HSP47活性对成熟胶原蛋白生成和变性胶原蛋白积累的影响。为了检查 HSP 活性对人牙周膜细胞中成熟胶原蛋白产生的影响，使用 ELISA 进行了分析。此外，为了检查 HSP 活性降低对人牙周膜细胞胶原蛋白代谢的影响，使用荧光探针胶原蛋白杂交肽 (CHP) 标记变性胶原蛋白，并使用共聚焦显微镜进行评估。

项目成果

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专著数量（0）

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专利数量（0）

Cellular senescence with SASP in periodontal ligament cells triggers inflammation in aging periodontal tissue

牙周膜细胞中 SASP 的细胞衰老引发老化牙周组织的炎症

DOI：
10.18632/aging.204569
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kuniko Ikegami; Motozo Yamashita; Mio Suzuki; Tomomi Nakamura; Koki Hashimoto; Jirouta Kitagaki; Manabu Yanagita; Masahiro Kitamura; Shinya Murakami
通讯作者：
Shinya Murakami