Development of an innovative molecular targeting therapy for GIST based on intracellular localization of mutated KIT

基于突变 KIT 的细胞内定位开发创新的 GIST 分子靶向治疗

• 批准号: 22K08883
• 负责人: 西田 俊朗
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: National Institutes of Biomedical Innovation, Health and Nutrition
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08883/
• 关键词: GIST; 消化管間質細胞腫; KIT; 遺伝子変異; PKD2); 細胞内局在; タンパク輸送; ゴルジ

「研究の目的」本研究では，消化管間質細胞腫 (gastrointestinal stromal tumor: GIST) の主原因の変異KITチロシンキナーゼのゴルジ停留とそこからの増殖シグナル発信の要因としてin vitroの実験で明らかにした Protein Kinase D2 (PKD2) を中心に，ゴルジ停留の詳細な分子機構, チロシンリン酸化の必要性, 更にはこれらを踏まえた治療薬開発の基盤的解明を目的としている。｛進捗概要」本年度は，複数のGIST細胞株 (イマチニブ感受性株: GIST-T1; イマチニブ耐性株: GIST-R9, GIST430/654, GIST48) を用い，PKDキナーゼ阻害剤(CRT0066101)の効果を調べた。PKD阻害剤は，いずれのGIST細胞株に対しても細胞形態の収縮, 増殖抑制効果を示し，細胞死の誘導が観察され，8時間以内にアポトーシスマーカーのレベルが亢進していることが確認された。PKD阻害剤処理で自己リン酸化（PKD2活性化の指標として用いた）は抑制された。PKD阻害剤処理で，イマチニブ感受性，耐性に関わらず，変異KITはゴルジ領域から離れリソソームに移行し，変異KITが分解されていることを示唆するデータを得ている。また，PKD2阻害でPKDのエフェクターであるPI4-Kinase IIIB (PI4KIIIB) の産生物質PI4Pのレベルが低下した。siRNAによるPI4KIIIBのノックダウンは，CRT0066101処理と形態学的にも生化学的結果も類似し，KIT変異GISTではPKD2-PI4KIIIBが活性化していることを示唆した。今後，PKR2-PI4KIIIB経路活性化におけるKIT活性化の意義の解析と，臨床検体, ノックインマウスでの実験を行う。

“研究目的” 在这项研究中，体外实验表明，突变型 KIT 酪氨酸激酶是胃肠道间质瘤 (GIST) 的主要原因，也是高尔基体滞留和增殖信号传递的一个因素。旨在阐明高尔基体滞留的详细分子机制、酪氨酸磷酸化的必要性以及基于这些的治疗药物开发的基础，重点关注蛋白激酶D2（PKD2）。 {进展概述] 今年，我们使用多种 GIST 细胞系（伊马替尼敏感株：GIST-T1；伊马替尼耐药株：GIST-R9、GIST430/654、GIST48）研究了 PKD 激酶抑制剂（CRT0066101）的作用。 。 PKD 抑制剂对所有 GIST 细胞系表现出细胞形态收缩和生长抑制作用，观察到细胞死亡的诱导，并在 8 小时内证实了凋亡标记物水平的增加。 PKD 抑制剂治疗可抑制自磷酸化（用作 PKD2 激活的指标）。我们获得的数据表明，用 PKD 抑制剂治疗后，突变型 KIT 会离开高尔基体区域并迁移到溶酶体，并在溶酶体中被降解，无论伊马替尼敏感性或耐药性如何。此外，PKD2 抑制降低了 PI4P 的水平，PI4P 是 PI4 激酶 IIIB (PI4KIIIB) 的产物，是 PKD 的效应物。 siRNA 敲低 PI4KIIIB 与 CRT0066101 处理具有相似的形态学和生化结果，表明 PKD2-PI4KIIIB 在 KIT 突变型 GIST 中被激活。未来我们将分析KIT激活在PKR2-PI4KIIIB通路激活中的意义，并利用临床标本和敲入小鼠进行实验。

项目成果

Advance in Surgical Resection of GIST

胃肠道间质瘤手术切除进展

• 发表时间: 2022
• 作者: Toshiro Nishida

Pimitespib in patients with advanced gastrointestinal stromal tumor (CHAPTER-GIST-301): a randomized, double-blind, placebo-controlled phase III trial

Pimitespib 治疗晚期胃肠道间质瘤患者（CHAPTER-GIST-301）：一项随机、双盲、安慰剂对照 III 期试验

• DOI: 10.1016/j.annonc.2022.05.518
• 发表时间: 2022
• 影响因子: 50.5
• 作者: Kurokawa Y.;Honma Y.;Sawaki A.;Naito Y.;Iwagami S.;Komatsu Y.;Takahashi T.;Nishida T.;Doi T.
• 通讯作者: Doi T.

Surgery for coexistence of GIST and additional malignancy

胃肠道间质瘤和其他恶性肿瘤共存的手术

• 发表时间: 2022
• 作者: Toshiro Nishida

Real-world data on the efficacy and safety of adjuvant chemotherapy in Japanese patients with a high- risk of gastrointestinal stromal tumor recurrence

日本胃肠道间质瘤复发高危患者辅助化疗有效性和安全性的真实世界数据

• DOI: 10.1007/s10147-022-02135-7
• 发表时间: 2022
• 作者: Ushimaru Y; Takahashi T; Nakajima K; Teranishi R; Nishida T; Hirota S; Motoori M; Omori T; Kawabata R; Nishikawa K; Saito T; Yamashita K; Tanaka K; Makino T; Yamamoto K; Kurokawa Y; Eguchi H; Doki Y.
• 通讯作者: Doki Y.

Efficacy and safety of regorafenib in Japanese patients with advanced gastrointestinal stromal tumors.

瑞戈非尼对日本晚期胃肠道间质瘤患者的疗效和安全性。

• DOI: 10.1007/s10147-022-02159-z
• 发表时间: 2022
• 作者: Teranishi R; Takahashi T; Nishida T; Hirota S; Kurokawa Y; Saito T; Yamamoto K; Yamashita K; Tanaka K; Makino T; Motoori M; Omori T; Nakajima K; Eguchi H; Doki Y.
• 通讯作者: Doki Y.