HMGB1ペプチドを用いた末梢血間葉系幹細胞動員による腎線維化の抑制

使用 HMGB1 肽动员外周血间充质干细胞抑制肾纤维化

• 批准号: 22K08690
• 负责人: 谷口 歩
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08690/
• 关键词: HMGB1; 腎; 線維化; 慢性腎障害; 再生誘導

本研究では、High mobility group box 1 (HMGB1)のうち骨髄間葉系細胞血中動員活性ドメインKOI2を含むペプチドを用いて間葉系幹細胞を腎へ誘導しすることにより腎障害を抑制しうるか、また同ペプチドの腎不全に対する臨床応用の可能性について検討している。本年度は既に作成方法を確立している雄性SDラットを用いた片側尿管閉塞モデルを腎線維化の例として、まずは2週間HMGB1ペプチドを既知のプロトコルに沿って投与するスケジュールで実験を行った。病理組織像等で腎線維化を観評価したが、ペプチド投与による有意な繊維化の抑制を認めなかった。個体ごとのデータのばらつきも存在したため、個体数を増やして再検を行ったが、治療効果を認めなかった。線維化の完成後のみではなく障害の早期も併せて観察する必要があると考えたため、急性腎障害の代表的なモデルである虚血再灌流障害モデルでも並行して投薬実験を行い、こちらは血清学的な評価を中心に観察したが、やはり治療効果を認めなかった。ここで肝線維化に対する投与実験の経過を参考とし、より長期間の投薬が有効である可能性が高いと判断し、慢性腎線維化に対するペプチド投与プロトコルの見直しを行い、実験予定とした。また、慢性モデルでの再検討と並行して、ペプチドの薬効を妨げる機序が存在するのか詳細に検討するためにシングルセル解析を用いた腎障害の評価を行った。ラットにおけるシングルセル解析の知見蓄積不足という背景を鑑みて、短期間で解析を開始できる急性腎不全モデルを先行して解析に着手した。

在本研究中，我们研究了是否可以通过使用含有高迁移率族蛋白1（HMGB1）的骨髓间充质细胞血液募集激活结构域KOI2的肽将间充质干细胞引导至肾脏来抑制肾损伤。我们也在研究这种可能性。相同肽治疗肾衰竭的临床应用。今年，我们使用已经建立了制作方法的雄性SD大鼠，以肾纤维化为例，进行了单侧输尿管梗阻模型的实验，按照方案，将HMGB1肽给药2周。已知协议。使用组织病理学图像观察和评估肾纤维化，但施用肽没有观察到对纤维化的显着抑制。由于每个人的数据存在差异，因此增加了人数进行了重新测试，但没有发现治疗效果。因为我们认为不仅需要观察纤维化的完成情况，还需要观察损伤的早期阶段，因此我们与缺血再灌注损伤模型并行进行了药物实验，缺血再灌注损伤模型是急性肾损伤的典型模型。观察血清学评价，未观察到治疗效果。根据肝纤维化给药实验的进展，我们确定长期给药可能有效，因此我们回顾了慢性肾纤维化的肽给药方案并决定计划该实验。此外，在慢性模型中重新检查的同时，我们利用单细胞分析评估了肾脏损伤，以详细检查是否存在干扰肽功效的机制。考虑到缺乏对大鼠单细胞分析的积累知识，我们首先开发了可以在短时间内开始分析的急性肾衰竭模型来开始分析。

项目成果

ラット両側腎虚血再灌流モデルに対する単一細胞トランスクリプトーム解析

大鼠双侧肾缺血再灌注模型的单细胞转录组分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 谷口歩; 宮下和也; 深江彰太; 田中亮; 西田真美; 北山智美; 新保敬史; 中澤成晃; 山中和明; 今村亮一; 玉井克人; 野々村祝夫
• 通讯作者: 野々村祝夫

Single-cell transcriptome analysis of a rat model of bilateral renal ischemia-reperfusion injury

双侧肾缺血再灌注损伤模型的单细胞转录组分析

• DOI: 10.1016/j.bbrep.2023.101433
• 发表时间: 2023-03
• 影响因子: 2.7
• 作者: Taniguchi, Ayumu;Miyashita, Kazuya;Fukae, Shota;Tanaka, Ryo;Nishida, Mami;Kitayama, Tomomi;Ouchi, Yuya;Shimbo, Takashi;Nakazawa, Shigeaki;Yamanaka, Kazuaki;Imamura, Ryoichi;Tamai, Katsuto;Nonomura, Norio
• 通讯作者: Nonomura, Norio