Identification of a novel cardiac fibroblast subset that regulates post-infarction inflammation and repair

鉴定调节梗死后炎症和修复的新型心脏成纤维细胞亚群

基本信息

批准号：
22K08138
负责人：
安西淳
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08138/
关键词：
心筋梗塞心不全炎症免疫応答心臓線維芽細胞

项目摘要

遺伝子X ノックアウト（X-KO）マウスにMI を作製し、28 日間観察すると、その生存率は野生型（WT）マウスと比較して改善傾向にあり、左室駆出率や左室拡張末期径など左心機能の指標は有意差を持って良好であった。X-KO マウスではLy6Chigh 単球の浸潤が有意に低く、炎症性サイトカインの遺伝子発現も有意に抑制されていた。Ly6Chigh 単球を梗塞部へ誘導する炎症性ケモカイン、CCL2/CCL7の遺伝子発現もX-KO マウスで有意に減少していた。梗塞部においてどの細胞由来のX が重要かを骨髄移植(BMT)モデルで確認したところ、心臓間質細胞由来のX の重要性が示唆された。Flow cytometry 法により心臓間質細胞(CD45-)を内皮細胞、線維芽細胞、それ以外の三つに分け、X-GFP/+レポーターマウスを用いてX の発現を検討すると、内皮細胞と線維芽細胞でX の発現を認めた。一方、各細胞群をFACS でソートし、CCL2 とCCL7 の遺伝子発現を検討すると、線維芽細胞でのみ有意な発現を認めた。心臓線維芽細胞特異的XコンディショナルKOマウスはコントロールマウスと比較して、生存率が有意に高く、左心機能の著明な改善を認めた。さらに梗塞部位に集積する炎症細胞をflow cytometry法で解析すると、心臓線維芽細胞特異的X-コンディショナルKOマウスではLy6Chigh単球(CD45+CD11b+F4/80-Ly6Chigh)の浸潤が有意に低く、qPCRで解析した梗塞部のInterleukin（IL）-1β、IL-6などの炎症性サイトカイン、CCL2/CCL7などの炎症性ケモカインの発現も顕著に抑制されており、心臓線維芽細胞特異的X-コンディショナルKOマウスにおいて、X-full KOマウスで見られた表現型が再現されたことを確認した。

当在基因中创建 MI 时，左心功能指数等是有利的，但存在显着差异。在X-KO小鼠中，Ly6Chigh单核细胞的浸润显着降低，炎症细胞因子的基因表达也显着受到抑制。 CCL2/CCL7（一种诱导 Ly6Chigh 单核细胞到达梗塞区域的炎症趋化因子）的基因表达在 X-KO 小鼠中也显着降低。当我们使用骨髓移植 (BMT) 模型来确认哪些细胞来源的 X 在梗塞区域中很重要时，提出了心脏间质细胞来源的 X 的重要性。使用流式细胞术将心脏间质细胞（CD45-）分为内皮细胞、成纤维细胞和其他三组，并且当使用X-GFP/+报告小鼠检测X表达时，分离内皮细胞和成纤维细胞，观察到X的表达。在细胞中。另一方面，当通过FACS分选各细胞组并检查CCL2和CCL7的基因表达时，仅在成纤维细胞中观察到显着的表达。与对照小鼠相比，心脏成纤维细胞特异性 X 条件 KO 小鼠的存活率显着更高，左心功能也显着改善。此外，梗塞区域积聚的炎症细胞会流动通过细胞计数分析，心脏成纤维细胞特异性 X 条件 KO 小鼠中 Ly6Chigh 单核细胞 (CD45+CD11b+F4/80-Ly6Chigh) 的浸润显着降低，并且白细胞介素 (IL)-1β 和 IL-6 等炎症细胞因子以及 CCL2/CCL7 等炎症趋化因子的表达也显着受到抑制，并且在心脏成纤维细胞特异性 X 条件 KO 小鼠中，X-full我们证实在 KO 小鼠中观察到的表型得到了重现。