the mechanism of microglial polarity switching by stress-induced mitophagy abnormality.

应激诱导线粒体自噬异常导致小胶质细胞极性转换的机制。

基本信息

批准号：
22K07378
负责人：
平澤孝枝
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

ストレスを受けたマウスや精神疾患モデルマウスでは、ミクログリアが活性化することが報告されている。申請者は、これまでに生後直後のストレスがミクログリアの発生由来を肝臓から骨髄由来へとシフトさせる知見を得ている（科研費基盤(C); 19K08353）。さらに、ストレスを与えたマウスや自閉症などの疾患モデルマウスにおいて脳内ミクログリアが既に炎症反応を起こしている知見を得ている。その結果から、幼若期ストレスに起因するミクログリアの活性化は単に由来だけではなく、M1/M2という極性の変化であると考え、幼若期のストレスによって起こるミクログリアの極性転換経路について、11β-HSD1によるグルココルチコイドの活性化を引き金としたミトコンドリア代謝活性異常との関連を明らかにすることを目的とする。本年度はミクログリアの単離法の開発に着手した。本研究では出来るだけ多くのミクログリアを必要としM1/M2が刺激に応じて変化するかを検討している。まず、生後マウス脳よりパーコール法を用いた単離法や、アストロサイト培養細胞からの単離法、マイクロビーズ法による単離法と検討した。パーコール法では回収は可能であるが、多くの他の細胞も含まれることがあったため、マイクロビーズを行い、純度を挙げる方法を検討した。その結果、より純度の高いミクログリアはアストロサイト培養下にて、ピペッティングより単離し、その後マイクロビーズにて単離する方法がより純度の高いものが得られることが分かった。今後、これらのミクログリアの性質を検討していく。また、現在混合培養におけるニューロン－グリア（アストロサイト、ミクログリア）の相関を検討し、ミクログリアの極性と保護、炎症作用を検討している。

据报道，应激小鼠和精神疾病模型小鼠的小胶质细胞被激活。申请人之前已获悉，出生后立即承受的压力会将小胶质细胞发育的起源从肝脏转移到骨髓（科学研究补助金（C）；19K08353）。此外，我们发现大脑中的小胶质细胞已经在应激小鼠和自闭症等疾病模型小鼠中引起炎症反应。从结果来看，我们认为，生命早期因压力而引起的小胶质细胞的激活不仅仅是由于起源，也是由于M1/M2极性的变化所致。本研究的目的是阐明两者之间的关系。 HSD1 激活糖皮质激素引发线粒体代谢活动异常。今年，我们开始开发一种分离小胶质细胞的方法。这项研究需要尽可能多的小胶质细胞，并检查 M1/M2 是否会因刺激而发生变化。首先，我们研究了使用Percoll法从出生后小鼠脑中分离的方法、从培养的星形胶质细胞中分离的方法以及使用微珠法的分离方法。虽然可以使用 Percoll 法进行回收，但由于还包含许多其他细胞，我们研究了通过使用微珠来提高纯度的方法。结果发现，通过在培养星形胶质细胞时通过移液分离小胶质细胞，然后使用微珠，可以获得更纯的小胶质细胞。将来，我们将研究这些小胶质细胞的特性。此外，我们目前正在研究混合培养物中神经元-胶质细胞（星形胶质细胞、小胶质细胞）的关系，并研究小胶质细胞的极性、保护和炎症作用。