骨髄腫の薬剤耐性におけるオートファジーネットワークの解明と、阻害による耐性化克服

阐明导致骨髓瘤耐药性的自噬网络并通过抑制克服耐药性

• 批准号: 22K06653
• 负责人: 森谷 昇太
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06653/
• 关键词: 骨髄腫; 微小環境; オートファジー; マクロライド; プロテアソーム; ボルテゾミブ; 多発性骨髄腫

骨髄腫難治性の原因の一つに、間質細胞と骨髄腫の接着によって誘導される間質誘導性薬剤抵抗がある。研究代表者はこれまで、間質細胞と骨髄腫細胞株を共培養すると、間質細胞側にオートファジーが誘導されるとの予備的知見を得ている。そこで、間質細胞誘導性薬剤抵抗におけるオートファジーの役割を解明するためにオートファジー誘導に必須なATG5遺伝子をCRISPR/Cas9で欠損したLP101骨髄間質細胞株を作成した。この間質細胞株のレイヤーの上に、EGFPで標識した骨髄腫細胞株（RPMI8226, IM-9）を播種し、フローサイトメーターで骨髄腫細胞株の生細胞数を検討した。骨髄腫の代表的な治療薬であるボルテゾミブ(BZ)の殺細胞作用を検討したところ、いずれの細胞株の組み合わせにおいても間質細胞はBZの骨髄腫細胞株に対する殺細胞作用を軽減させた。しかしながら、現状、野生型間質細胞株とATG5欠損間質細胞の比較では骨髄腫株に対する薬剤抵抗性の誘導能に明確な差は見られていない。今後、他の薬剤や別の間質細胞でも同様に検討を進めていく。

骨髓瘤难治性的原因之一是基质细胞与骨髓瘤之间的粘附诱导的基质诱导的耐药性。主要研究人员此前已获得初步发现，当基质细胞和骨髓瘤细胞系共培养时，基质细胞中会诱导自噬。因此，为了阐明自噬在基质细胞诱导的耐药性中的作用，我们创建了LP101骨髓基质细胞系，其中使用CRISPR/Cas9删除了自噬诱导所必需的ATG5基因。将用EGFP标记的骨髓瘤细胞系(RPMI8226，IM-9)接种在该层基质细胞系的顶部，并使用流式细胞仪检查骨髓瘤细胞系的活细胞数量。当我们研究典型的骨髓瘤治疗药物硼替佐米（BZ）的细胞杀伤作用时，我们发现在所有细胞系组合中，基质细胞降低了BZ对骨髓瘤细胞系的细胞杀伤作用。然而，目前，在比较野生型基质细胞系和ATG5缺陷型基质细胞时，在诱导针对骨髓瘤系的耐药性的能力方面尚未观察到明显差异。将来，我们将使用其他药物和其他基质细胞进行类似的研究。

项目成果

東京医科大学 生化学分野

东京医科大学生物化学系

多発性骨髄腫細胞に対するvenetoclax とビタミンK2併用によるアポトーシス誘導増強効果とその分子基盤の解明

阐明维奈托克联合维生素K2对多发性骨髓瘤细胞增强凋亡诱导作用及其分子基础

• 发表时间: 2022
• 作者: 吉村詩緒莉; 犀川莉奈; 森谷昇太; 風間宏美; 高野直治; 宮澤啓介
• 通讯作者: 宮澤啓介

イソリキリチゲニンはプロテアソームを阻害することにより細胞内タンパク質凝集体の蓄積を誘導するとともにサバイビンの発現を抑制することによりヒトメラノーマ細胞に細胞死を引き起こす

Isoriquiritigenin 通过抑制蛋白酶体诱导细胞内蛋白质聚集体的积累，并通过抑制生存素表达导致人黑色素瘤细胞死亡。

• 发表时间: 2022
• 作者: 阿部 晃久; 森谷 昇太; 風間 宏美
• 通讯作者: 風間 宏美

東京医科大学医学会奨励賞受賞講演：細胞内タンパク質分解系の同時阻害はNOXAの分解を抑制することで骨髄腫における間質細胞誘導性ボルテゾミブ耐性を克服する

东京医科大学医学会鼓励奖颁奖：同时抑制细胞内蛋白水解系统，通过抑制 NOXA 降解克服骨髓瘤中基质细胞诱导的硼替佐米耐药性

• 发表时间: 2022
• 作者: 森谷 昇太

東京医科大学 分子標的探索センター

东京医科大学分子靶标发现中心