Development of the theranostic strategy SMART-PaC for pancreatic cancer

胰腺癌治疗诊断策略 SMART-PaC 的开发

• 批准号: 22K19513
• 负责人: 辻 厚至
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: National Institutes for Quantum Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19513/
• 关键词: 膵癌; 核医学; 診断; 治療

標的タンパク質は7回膜貫通タンパク質であり，生体内で機能する高親和性抗体を得るためには，生体と同じ高次構造を持つエピトープが必要である。そのため、高次構造の提示する複数の抗原を得るために、目的タンパク質を強制発現させたカイコのミクロソーム画分、もともと発現しているヒトがん細胞株での検出感度の評価を行った。対象として細胞外ドメインの精製タンパク質を準備した。開発済みの抗体を利用して、高感度デジタル検出法を試行したところ、ミクロソーム画分、ヒトがん細胞の検出感度は低かった。そのため、他の方法として、増感ELISA法を試行したが、こちらも十分な感度が得られなかった。どこで、新たな抗体を取得するために、高品位完全ヒト抗体ライブラリーから高効率抗体単離法ICOSで抽出することを試みたが、高親和性抗体が得られなかった。そのため、ライブラリーの再構築を行った。来年度は、新規ライブラリーでの高親和性抗体スクリーニングとその評価、またエクソソーム画分に目的タンパク質が含まれているかどうかの検証を行う計画である。

目标蛋白是七次跨膜蛋白，为了获得在体内起作用的高亲和力抗体，需要具有与生物体相同的高阶结构的表位。因此，为了获得由高级结构呈递的多种抗原，我们评估了强制表达目标蛋白的蚕微粒体级分和最初表达它们的人类癌细胞系中的检测灵敏度。制备纯化的胞外结构域蛋白作为靶标。当我们使用开发的抗体尝试高灵敏度数字检测方法时，微粒体组分和人类癌细胞的检测灵敏度较低。因此，我们尝试了增强ELISA方法作为另一种方法，但这也没有足够的灵敏度。为了获得新的抗体，我们尝试使用高效抗体分离方法ICOS从高质量的全人抗体库中提取它们，但没有获得高亲和力的抗体。于是，图书馆得以重建。明年，我们计划使用新的文库进行高亲和力抗体筛选和评估，并验证外泌体组分中是否含有目标蛋白。