NPAT遺伝子のRNAiによる腫瘍増殖抑制の基礎的研究

NPAT基因RNAi抑制肿瘤生长的基础研究

基本信息

批准号：
17790473
负责人：
辻厚至
金额：
$ 2.18万
依托单位：
National Institute of Radiological Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度に、NPAT遺伝子の発現を効率良く抑制するsiRNAを見いだした。また、腫瘍抑制効果を個体レベルで判定するための腫瘍移植モデルの条件検討を行い、子宮頸癌、大腸がん、中皮腫の皮下移植モデルの作成に成功した。中皮腫に関しては、2種類の細胞株で成功し、今年度、中皮腫マーカーの免疫染色を行ったところ、それぞれ上皮型と肉腫型であった。中皮腫は上皮型が50-70%と報告されており、多くの患者さんに適用可能な治療法の開発が期待できる。中皮腫は、胸膜に発生することが知られており、他のがんでは、同所移植と皮下移植では、がんの特性が変わることも報告されている。そこで、より臨床に則したモデル系を樹立するために、胸膜腔への移植も試みた。胸膜腔への移植も上皮型、肉腫型の両方で成功した。胸膜腔移植中皮腫の増殖の評価には非侵襲的なイメージングが必要である。そこでCTとFDG-PETで、腫瘍をイメージングできるかどうかを検討した。CT撮像で0.5mmほどの腫瘍をイメージングできることがわかったが、呼吸によるアーチファクトがあることもわかった。呼吸同期法は今後検討していく必要がある。FDG-PETでもイメージングに成功した。PETは腫瘍の治療効果の判定に向いており、これらの結果から、胸膜腔移植モデルでもNAPT siRNAによる治療の効果の判定ができることがわかった。皮下腫瘍モデルマウスに、NPAT siRNAを局所注射により導入して、腫瘍増殖能の変化を検討したが、コントロールsiRNA投与群に比べ統計的有意差はなかった。培養細胞レベルでは効果があったことから、個体レベルでのsiRNAの導入効率が悪く、NPATの発現抑制が十分でなかったことが考えられた。そこで、siRNA導入腫瘍のNPATの発現量を調べたところ、コントロールsiRNAとNPAT siRNAでは有意差はなかった。このことから、効率良く腫瘍にsiRNAを導入する方法を検討することが必要であることがわかった。

去年，我们发现了能够有效抑制 NPAT 基因表达的 siRNA。此外，我们还研究了肿瘤移植模型的条件，以确定个体水平的肿瘤抑制效果，并成功创建了宫颈癌、结直肠癌和间皮瘤的皮下移植模型。关于间皮瘤，我们在两种类型的细胞系上取得了成功，今年，当我们对间皮瘤标记物进行免疫染色时，发现它分别是上皮型和肉瘤样型。据报道，50-70%的间皮瘤是上皮型，希望能够开发出适用于很多患者的治疗方法。已知间皮瘤发生在胸膜中，并且据报道，其他癌症的特征在原位移植和皮下移植之间有所不同。因此，为了建立更临床适用的模型系统，我们也尝试了胸膜腔移植。对于上皮型和肉瘤型，胸膜腔移植也取得了成功。需要无创成像来评估胸膜植入物间皮瘤的生长。因此，我们研究了是否可以使用 CT 和 FDG-PET 对肿瘤进行成像。研究发现CT成像可以对小至0.5毫米的肿瘤进行成像，但也发现存在呼吸引起的伪影。未来需要研究呼吸同步。 FDG-PET 成像也取得了成功。 PET适合确定肿瘤治疗的疗效，这些结果表明，即使在胸膜腔移植模型中也可以确定NAPT siRNA治疗的疗效。通过局部注射将NPAT siRNA引入肿瘤模型小鼠皮下，以检测肿瘤生长能力的变化，但与对照siRNA给药组相比没有统计学上的显着差异。由于其在培养细胞水平上有效，因此认为在个体水平上导入siRNA的效率较差并且对NPAT表达的抑制不充分。因此，当我们研究引入siRNA的肿瘤中NPAT的表达水平时，对照siRNA和NPAT siRNA之间没有显着差异。由此可知，有必要研究将siRNA有效导入肿瘤的方法。