遺伝子タギング法によるウイルス病抵抗性遺伝子と抵抗性発現調節遺伝子の単離と解析

利用基因标签方法分离和分析病毒病抗性基因和抗性表达调控基因

基本信息

批准号：
08760042
负责人：
高橋英樹
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

キュウリモザイクウイルス系統(CMV-Y)をアラビドプシスecotype C24に接種すると過敏感反応を、ecotype Col.に接種すると全身感染を示す。これまでの研究よりこの過敏感反応は、C24の有する単一優性遺伝子(RCY1)とCMV-YのRNA3に存在する非病原性遺伝子との組合せにより誘導されることが明らかになっている。本研究では、遺伝子タギング法によりRCY1を単離するために、RCY1の遺伝子マッピングとC24へのトランスポゾンの導入を行った。(1)これまでに遺伝子地図上にマップされている遺伝的マーカーとSSLPマーカーを用いてArabidopsis thaliana C24染色体上におけるRCY1遺伝子の位置を解析したところ、第5染色体のマーカーnga139とnga106の間に存在することが明らかになった。(2)C24を、トウモロコシのトランスポゾンAcを導入したアラビドプシス【.right filled triangle.】Nae IsAc(Gus)-1(Arabidopsis Biological Resource Center,Ohio,U.S.A.)と交配し、transposase遺伝子をC24に導入した。(3)C24をトウモロコシのトランスポゾンDsを導入したアラビドプシスHmR Ds-A3(Arabidopsis Biological Resource Center,Ohio,U.S.A)と交配し、DsエレメントをC24に導入した。(4)交配により得られた両植物をかけ合わせ種子を得た。この種子細胞にはAcとDsが共存するため、Dsに転移が誘導される。これからは、得られた約10,000種子について、CMV-Yに対する反応を調べ、RCY1遺伝子がDsの挿入を受けて不活性化されCMV-Yが全身感染するようになった個体(RCY1がトランスポゾンタギングされた個体)を選抜する予定である。

在拟南芥生态型C24中接种了黄瓜镶嵌病毒系统（CMV-Y），显示了过度敏感性反应，并带有生态型上校的系统感染表明一般感染。已经揭示了这种过度敏感性反应是由C24的单占主导基因（RCY1）和非致病基因在CMV-Y的RNA3中诱导的。在这项研究中，通过遗传标记方法将RCY1的遗传图和转座子转换为C24。（1）到目前为止，已经在遗传图上绘制过的拟南芥基因在拟南芥C24 C24染色体上已经分析了拟南芥，并存在于第五个染色体标记NGA139和NGA106之间。（2）C24是一种拟南芥[。填充三角形。] NAE ISAC（GUS）-1，将转座酶基因引入C24。（3）C24与拟南芥HMR DS-A3（美国俄亥俄州拟南芥生物资源中心）杂交，该C24引入了C24，并将DS元素引入了C24。（4）施用了通过交叉获得的两种植物。 AC和DS在该种子细胞中共存，并诱导DS转移。从现在开始，研究了对CMV-Y的反应，对获得约10,000种的CMV-Y进行了研究，RCY1基因已被DS的插入灭活，并且CMV-Y已转移到整个体内（RCY1已转牙体。个人将被选中。