ナシにおける植物体再生方法の確立と形質転換体の作出に関する基礎的研究

梨植物再生方法建立及转化子生产的基础研究

• 批准号: 08760024
• 负责人: 中野 優
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08760024/
• 关键词: ニホンナシ; セイヨウナシ; Agrobacterium; 不定芽分化; 遺伝子導入

本実験は,形質転換技術を用いたナシの育種を最終目的として行った.まず数品種のニホンナシおよびセイヨウナシを用いて,培養組織からの効率的な植物体再生方法を検討した.休暇枝の側芽から誘導した組織培養植物体の葉片を用いて,高頻度の不定芽誘導条件を検討したところ,尿素系のサイトカイニン(TDZ,CPPU等)存在下で比較的高頻度の不定芽形成が誘導され,さらにこの不定芽形成がGAにより促進されることが明らかとなった.また,葉片からの不定芽形成には品種間差異が観察され,ニホンナシ品種よりもセイヨウナシ品種の方が概して不定芽誘導が容易であった.次に,GUS遺伝子の一時的な発現を指標として効率的なAgrobacterium接種条件の検討を行ったところ,現在までに外植体の前処理(前培養)およびアセトシリンゴン処理によりGUS遺伝子の一時的な発現が増大することが明らかとなっている.今後は,引き続きAgrobacterium接種条件の検討を行う一方で,さらに効率的な不定芽誘導条件および形質転換細胞・組織の選抜条件の検討を行う予定である.

本实验的最终目的是利用转化技术培育梨。首先，我们使用日本梨和欧洲梨的多个品种，利用来自侧芽的组织培养植物的叶片来研究有效的植物再生方法。检测到高频率的不定芽。当我们检查诱导条件时，我们发现在尿素基细胞分裂素（TDZ、CPPU等）存在下诱导了相对频繁的不定芽形成，并且GA进一步促进了不定芽形成。观察到品种从叶盘形成不定芽，并且欧洲梨品种通常比日本梨品种更容易诱导不定芽。 接下来，我们以 GUS 基因的临时表达为指标，研究了有效的农杆菌接种条件。外植体的预处理（预培养）和乙酰西林。已经表明，通过农杆菌处理，GUS基因瞬时表达增加。将来，在我们将继续研究农杆菌接种条件的同时，我们将开发更有效的不定芽诱导条件和转化细胞/组织，我们计划考虑以下方法。选择条件。