ウイルスが生み出す新しい抗原レパートリー「リポペプチド」の免疫パラダイムの確立

使用病毒产生的新抗原库“脂肽”建立免疫范例

基本信息

批准号：
12J05233
负责人：
森田大輔
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J05233/
关键词：
御防主宿リポペプチド免疫学エイズ

项目摘要

平成24年度は、リポペプチド抗原提示を担う分子機構の解明に向けて、以下の研究を展開した。1.特異的T細胞株の解析より、リポペプチド抗原提示分子は少なくともサル単球上に発現していることが分かっている。そこで、サル単球を免疫原として、マウスあるいはラットへの免疫を行った。脾臓細胞あるいはリンパ節細胞を回収し、ミエローマ細胞と細胞融合することにより、多数のモノクローナル抗体産生ハイブリドーマクローンを作製した。そして、この中から特異的T細胞株の応答を阻害する抗体のスクリーニングを行った。その結果、得られた阻害活性を持つ抗体群は、抗インテグリン抗体および抗MHCクラス1抗体に大別されたことから、リポペプチド抗原提示を担う接着分子および抗原提示分子について重要な知見が得られた。2.リポペプチド抗原(Cl4nef5-mer抗原)のペプチド配列あるいはアシル鎖長に様・々な変異を入れたアナログを合成し、その抗原活性を評価した。次に、抗原活性が見られなかったアナログについて、Cl4nef5-mer抗原との競合実験を行った。その結果、リポペプチド抗原提示には少なくとも以下の2タイプの様式があると考えられた(Morita et al. J.Virol. 2013)。a)ペプチド長は5残基を必要とし、リポペプチドのアシル鎖とN末端から5残基目(C末端)のアミノ酸残基が抗原提示分子へのアンカーとして機能する。そして、N末端から2残基目と4残基目のアミノ酸側鎖はT細胞による認識に重要な役割を果たしている。b)ペプチド長は4残基を必要とし、リポペプチドのアシル鎖が抗原提示分子へのアンカーとして機能する一方、N末端より5残基目のアミノ酸残基は不要である。N末端より4残基目のアミノ酸が、抗原提示分子への結合あるいはT細胞による認識のどちらか、あるいは両方に必須の役割を果たしている。

2012财年，我们进行了以下研究，旨在阐明脂肽抗原呈递的分子机制。 1.对特定T细胞系的分析表明，脂肽抗原呈递分子至少在猴单核细胞上表达。因此，使用猴单核细胞作为免疫原来免疫小鼠或大鼠。通过收集脾细胞或淋巴结细胞并将其与骨髓瘤细胞融合，产生大量产生单克隆抗体的杂交瘤克隆。然后他们筛选了抑制特定 T 细胞系反应的抗体。结果，获得的具有抑制活性的抗体组大致分为抗整合素抗体和抗MHC 1类抗体，提供了有关负责脂肽抗原呈递的粘附分子和抗原呈递分子的重要知识。 2.合成了肽序列或酰基链长度发生各种突变的脂肽抗原(Cl4nef5-mer抗原)的类似物，并评价了其抗原活性。接下来，我们对 Cl4nef5-mer 抗原进行了竞争实验，寻找没有表现出抗原活性的类似物。结果，认为至少存在以下两种类型的脂肽抗原呈递(Morita et al. J. Virol. 2013)。 a) 肽长度需要5个残基，脂肽的酰基链和从N端（C端）起的第5个氨基酸残基起到抗原呈递分子的锚定作用。 N端的第二个和第四个氨基酸侧链在T细胞的识别中发挥着重要作用。 b) 肽长度需要四个残基，虽然脂肽的酰基链起到抗原呈递分子的锚定作用，但 N 末端的第五个氨基酸残基是不必要的。 N 末端的第四个氨基酸残基在与抗原呈递分子的结合和/或 T 细胞的识别中起着重要作用。