小児期被ばくにおける発がん起源細胞の同定とがん化に重要なシグナル伝達系の探索

致癌细胞的鉴定和对儿童辐射暴露期间癌变重要的信号转导系统的探索

• 批准号: 26830089
• 负责人: 坂入 しのぶ(平野しのぶ)
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: National Institute of Radiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26830089/
• 关键词: 放射線; 小児期被ばく; 胸線リンパ腫; 発がん; 胸線細胞

子どもは大人に比べ放射線による発がんリスクが高いと言われているが、このリスク評価を行うための基礎データは充分に蓄積されていない。これまでに、ヒト急性リンパ性白血病のモデルであるマウス胸腺リンパ腫の発がん実験において、小児期（1週齢）にガンマ線（4Gy）を一回全身照射すると、成体期（7週齢）に比べて発生率が増加することがわかった。本研究では、なぜ小児期に被ばくすると胸腺はがん化するのか、その原因を明らかにするため、①照射直後の応答と②胸腺が腫大する過程に焦点をあて実験を行った。実験①では、照射後の胸腺の回復に伴う細胞増殖・細胞死に着目し、照射後に分化・増殖が盛んな分化段階の細胞（サブタイプ）を特定し、がん化へ発展する細胞増殖メカニズムを推定する。実験②では、前がん状態から胸腺の腫大に至るまでを経時的に解析し、がんの発生に重要なメカニズムを明らかにする事を目的とした。平成26年度は、実験①および実験②のサンプルを採取・保存するための実験系の確立を行った。初めに、照射後の胸腺細胞数の変化を経時的に調べた。具体的には、フローサイトメーター(FACS)を用いて、分化マーカーであるCD4とCD8の発現により胸線細胞をDN(double negative)、DP(double positive)およびSP(single positive)細胞(CD4SP,CD8SP)に分類し、全胸腺細胞の約1～2％しか存在しないDN細胞とISP(immature single positive)細胞については、マグネットビーズを用いて濃縮後、DN1からDN4そしてISP細胞を分類して細胞数を調べた。また、照射後増殖が活発な時期の胸腺細胞をサブタイプごとに分収し分子解析用に保存した。以上の方法により、照射後の胸線細胞再生過程では、初期分化過程であるDN細胞が最初に増加し、特に1週齢被ばくでは7週齢被ばくに比べて、分化・増殖が活発であることが明らかになった。

据说，儿童因辐射而罹患癌症的风险高于成人，但尚未积累足够的基础数据来评估这种风险。迄今为止，在使用人类急性淋巴细胞白血病模型小鼠胸腺淋巴瘤进行的致癌实验中，结果显示，在儿童时期（1周龄）接受一次全身伽马射线（4Gy）照射，与成年期（7周龄），发病率发现增加。在这项研究中，为了阐明为什么胸腺在儿童时期暴露于辐射时会癌变，我们进行了实验，重点关注（1）辐射后立即的反应和（2）胸腺肿胀的过程。在实验1中，我们关注与辐射后胸腺恢复相关的细胞增殖和细胞死亡，鉴定了辐射后活跃分化和增殖的分化阶段细胞（亚型），并研究了发展为癌症的细胞增殖机制。估计。在实验2中，我们分析了从癌前状态到胸腺随时间增大的过程，旨在阐明癌症发展的重要机制。 2014年度，我们建立了实验系统，收集并保存实验①和实验②的样本。首先，我们检查了照射后胸腺细胞数量随时间的变化。具体来说，使用流式细胞仪（FACS），我们将胸腺细胞与 DN（双阴性）、DP（双阳性）和 SP（单阳性）细胞（CD4SP、DN 细胞，分类为 CD8SP）区分开来，并且仅存在于约占所有胸腺细胞的 1-2%，以及 ISP（未成熟的单个胸腺细胞）使用磁珠浓缩阳性）细胞后，我们对 DN1 至 DN4 和 ISP 细胞进行分类，以确定细胞数量。此外，按亚型收集辐射后活跃增殖期间的胸腺细胞并储存用于分子分析。利用上述方法发现，在照射后的胸腺细胞再生过程中，处于早期分化过程的DN细胞首先增加，且与7周龄照射相比，1周龄照射时分化和增殖尤其活跃。一周后的暴露就变得很清楚了。

项目成果

マウス幼若期の放射線照射による胸線の細胞動態

幼鼠辐射照射引起的胸腺细胞动力学

• 发表时间: 2014
• 作者: Tsubota T;Okubo-Suzuki R;Ohashi Y;Tamura K;Ogata K;Yaguchi M;Matsuyama M;Inokuchi K;Miyashita Y;柳 東勲，西尾澄人，平田宏一;坂入しのぶ
• 通讯作者: 坂入しのぶ

マウス幼若期の放射線照射による胸線の回復動態

幼鼠放射线照射后胸线的恢复动态

• 发表时间: 2014
• 作者: 仁平（平） 直江;尾野 雅哉;吉田 清嗣;柿沼志津子 坂入しのぶ 島田義也;坂入しのぶ
• 通讯作者: 坂入しのぶ

胸腺･脾臓の放射線応答

胸腺和脾脏的放射反应

• 发表时间: 2014
• 期刊: 放射線生物研究
• 作者: 仁平（平） 直江;尾野 雅哉;吉田 清嗣;柿沼志津子 坂入しのぶ 島田義也
• 通讯作者: 柿沼志津子 坂入しのぶ 島田義也