小児期被ばくにおける発がん起源細胞の同定とがん化に重要なシグナル伝達系の探索

致癌细胞的鉴定和对儿童辐射暴露期间癌变重要的信号转导系统的探索

• 批准号: 26830089
• 负责人: 坂入 しのぶ(平野しのぶ)
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: National Institute of Radiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26830089/
• 关键词: 放射線; 小児期被ばく; 胸線リンパ腫; 発がん; 胸線細胞

子どもは大人に比べ放射線による発がんリスクが高いと言われているが、このリスク評価を行うための基礎データは充分に蓄積されていない。これまでに、ヒト急性リンパ性白血病のモデルであるマウス胸腺リンパ腫の発がん実験において、小児期（1週齢）にガンマ線（4Gy）を一回全身照射すると、成体期（7週齢）に比べて発生率が増加することがわかった。本研究では、なぜ小児期に被ばくすると胸腺はがん化するのか、その原因を明らかにするため、①照射直後の応答と②胸腺が腫大する過程に焦点をあて実験を行った。実験①では、照射後の胸腺の回復に伴う細胞増殖・細胞死に着目し、照射後に分化・増殖が盛んな分化段階の細胞（サブタイプ）を特定し、がん化へ発展する細胞増殖メカニズムを推定する。実験②では、前がん状態から胸腺の腫大に至るまでを経時的に解析し、がんの発生に重要なメカニズムを明らかにする事を目的とした。平成26年度は、実験①および実験②のサンプルを採取・保存するための実験系の確立を行った。初めに、照射後の胸腺細胞数の変化を経時的に調べた。具体的には、フローサイトメーター(FACS)を用いて、分化マーカーであるCD4とCD8の発現により胸線細胞をDN(double negative)、DP(double positive)およびSP(single positive)細胞(CD4SP,CD8SP)に分類し、全胸腺細胞の約1～2％しか存在しないDN細胞とISP(immature single positive)細胞については、マグネットビーズを用いて濃縮後、DN1からDN4そしてISP細胞を分類して細胞数を調べた。また、照射後増殖が活発な時期の胸腺細胞をサブタイプごとに分収し分子解析用に保存した。以上の方法により、照射後の胸線細胞再生過程では、初期分化過程であるDN細胞が最初に増加し、特に1週齢被ばくでは7週齢被ばくに比べて、分化・増殖が活発であることが明らかになった。

据说，儿童比成人造成的癌症风险更高，但这种风险评估的基本数据尚未积累。迄今为止，在小鼠胸腺淋巴瘤的癌变实验中，人类急性淋巴细胞性白血病的模型，已经发现，一旦儿童期（1周龄）的伽玛射线（4GY）全身照射，与成人相比，发病率率会增加（7周）。在这项研究中，我们进行了一项重点，重点是1）辐照后立即反应，以及2）胸腺在儿童中肿大以澄清原因。在实验1中，我们专注于辐射后的细胞增殖和细胞死亡，并在分化阶段鉴定细胞（亚型），在分化阶段积极地进行了分化和增殖，并估算了发展为癌症的细胞增殖机制。实验2旨在分析随着时间的流逝，从癌症前癌到增大胸腺的状况，并阐明对癌症发展重要的机制。 2014年，建立了一个实验系统，以从实验1和实验2中收集和存储样品。首先，随着时间的推移，检查了辐照后胸腺细胞数量的变化。具体而言，通过表达分化标记CD4和CD8，使用流式细胞仪（FACS）将乳腺细胞分为双阴性（DP），双阳性（DP）和单个阳性（SP），细胞（CD4SP，CD8SP）。 For DN cells and ISP (immature single positive (ISP), which are only 1-2% of all thymocytes, the cells were enriched using magnet beads, and then DN1 to DN4 and ISP cells were classified to determine the number of cells. Furthermore, thymocytes at a time when proliferation after irradiation was active were collected by subtype and stored for molecular analysis. By the above method, it was revealed该DN细胞是早期分化过程，最初在辐照后乳腺细胞再生期间增加，并且在暴露于一周大的时候，分化和增殖更为活跃，尤其是在暴露于一周大的时候。

项目成果

マウス幼若期の放射線照射による胸線の細胞動態

幼鼠辐射照射引起的胸腺细胞动力学

• 发表时间: 2014
• 作者: Tsubota T;Okubo-Suzuki R;Ohashi Y;Tamura K;Ogata K;Yaguchi M;Matsuyama M;Inokuchi K;Miyashita Y;柳 東勲，西尾澄人，平田宏一;坂入しのぶ
• 通讯作者: 坂入しのぶ

マウス幼若期の放射線照射による胸線の回復動態

幼鼠放射线照射后胸线的恢复动态

• 发表时间: 2014
• 作者: 仁平（平） 直江;尾野 雅哉;吉田 清嗣;柿沼志津子 坂入しのぶ 島田義也;坂入しのぶ
• 通讯作者: 坂入しのぶ

胸腺･脾臓の放射線応答

胸腺和脾脏的放射反应

• 发表时间: 2014
• 期刊: 放射線生物研究
• 作者: 仁平（平） 直江;尾野 雅哉;吉田 清嗣;柿沼志津子 坂入しのぶ 島田義也
• 通讯作者: 柿沼志津子 坂入しのぶ 島田義也