口腔潜在的悪性疾患のフローラ異常による悪性転化機構の解明と予防法の確立

口腔潜伏恶性疾病菌群异常恶变机制的阐明及预防方法的建立

• 批准号: 22K10204
• 负责人: 岡田 康男
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10204/
• 关键词: 口腔細菌叢（フローラ）; 口腔潜在的悪性疾患; 口腔癌; 口腔細菌叢のバランス破綻; 免疫組織化学; p53ロス; 細菌の産生因子

口腔潜在的悪性疾患や癌患者における口腔細菌叢（フローラ）のバランス破綻により正常細胞や組織構造に変化をきたす機構と潜在的悪性疾患や口腔癌の発生に関与する機序について明らかにすることを目的として細菌を採取した．採取したのは 口腔潜在的悪性疾患や癌患者30例における病変部各1検体と非病変部（舌背）各1検体の計60検体とコントロール10例の舌背部10検体で，総計70検体である．これらについてDNA塩基配列・分子系統解析（16S rRNA）により，菌種，量，分子系統解析およびその複雑な構成割合を明らかにするために，これまで口腔内細菌のDNAを抽出し，可変領域（V3-V4）のPCR増幅を行い，ライブラリー化，ライブラリー調整および次世代シーケンサーにより塩基配列を取得した．また，対象症例の口腔癌・前駆病変30例における生検組織ブロックを用いて組織・細胞の変化とその機構および細胞増殖能について明らかにするためにH-E染色病理組織像から抽出した切片部分について，角化異常に関してはCK13とCK17，がん抑制遺伝子に関してはp53とp21，細胞増殖能に関してはKi-67および上皮間葉転換に関してはE-CadherinとN-Cadherinの免疫組織化学染色を行い，解析を行っている．現在までのところ，採取した細菌のDNA塩基配列・分子系統解析（16S rRNA）により，コントロールに比べ病変部において細菌叢の違いを確認している．また，生検組織ブロックの生検組織のH-E染色病理組織像により，角化の違いを確認し，免疫組織化学染色により，p53の発現を認めない検体（p53ロス）が散見されている．

收集细菌的目的是阐明由于潜在口腔恶性疾病和癌症的患者口腔菌群平衡（Flora）平衡而改变正常细胞和组织结构的机制，以及潜在口腔癌的发展所涉及的机制。在30例潜在的口腔恶性疾病和癌症患者中，总共采集了样品，总共有60个样本，每个病变和一个标本，每个标本中的每个标本，每个标本中的每个标本（背舌），10个病变区域（背舌）的10例在10例中，总计70个标本，总计70个标本。为了阐明这些物种，量，分子系统发育分析和这些物种的复杂组成比，我们从口腔细菌，可变区域的PCR扩增（V3-V4）提取了DNA，并通过图书馆化，图书馆调整和下一代测序获得了基础序列。此外，为了澄清组织和细胞的变化，其机制和细胞增殖潜力使用活检组织阻滞在30种口腔癌/靶病例的前体病变中，CK13和CK17的免疫组织化学染色，用于角质性的异常，p53和P21的细胞和P21的细胞和p21的细胞 - kii-6777677767767776776777。分析了上皮 - 间质转变的N-钙粘着蛋白。迄今为止，与对照组相比，收集到的细菌的DNA核苷酸序列和分子系统发育分析（16S rRNA）证实了病变中细菌菌群的差异。此外，通过在活检组织块中活检组织的H-E染色组织病理学形象证实了角化化的差异，免疫组织化学染色显示出未显示p53表达的标本（p53损失）。