PARP阻害薬の頭頸部がんへの適応拡大のための新規合成致死性バイオマーカーの探索

寻找新型合成致死生物标志物以扩大 PARP 抑制剂治疗头颈癌的适应症

基本信息

批准号：
22K10184
负责人：
佐々木由香
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Osaka Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

臨床承認されているPARP阻害薬olaparibは相同性組換え修復因子であるBRCA1、BRCA2に変異を有するがん細胞に対して細胞死を誘導することから、副作用の少ない抗がん剤として期待されている。Olaparibの効果を増感する化合物および合成致死遺伝子の同定は、有効な化学療法が確立していない進行性頭頸部がんを含む複数のがん種への適応拡大に繋がると考えた。2022年度は、ヒト口腔がん細胞株HSC-2を用いて、olaparibに対して高感受性を誘導する因子の探索を行った。HSC-2細胞におけるolaparib感受性をCCKアッセイにより評価したところ、olaparibに対するIC80値は、9.3μMであったことから、HSC-2細胞が70～80%生存する10μMの濃度でolaparibを用いて、olaparib高感受性を誘導する化合物の探索を行った。計80化合物からなるキナーゼ阻害剤ライブラリーを用いて、olaparib感受性を解析した。その結果、olaparibの効果を相乗的に上昇させる化合物は得られなかったが、複数の化合物がolaparib耐性を誘導することが明らかとなり、これらの化合物の標的分子の機能阻害が、olaparibの効果を減弱させることが示唆された。また、olaparib耐性の獲得は治療上の問題となっていることから、olaparib耐性に関わる因子の探索を行うために、BRCA1ノックアウトがん細胞株より単離したolaparib耐性細胞を用いて、次世代シーケンス解析およびPathway解析を行った結果、複数の細胞内経路の遺伝子に発現変動が認められ、耐性に関わる遺伝子の候補を複数得ることができた。

临床批准的PARP抑制剂奥拉帕尼可诱导同源重组修复因子BRCA1和BRCA2突变的癌细胞死亡，因此有望成为一种副作用很少的抗癌药物。我们相信，鉴定出对奥拉帕尼作用敏感的化合物和合成致死基因将导致多种癌症类型的适应症扩大，包括尚未建立有效化疗的晚期头颈癌。 2022财年，我们使用人类口腔癌细胞系HSC-2来寻找诱导对奥拉帕尼高敏感性的因子。当通过 CCK 测定评估奥拉帕尼在 HSC-2 细胞中的敏感性时，奥拉帕尼的 IC80 值为 9.3 μM 我们寻找诱导高敏感性的化合物。使用由总共 80 种化合物组成的激酶抑制剂库分析奥拉帕尼的敏感性。结果，虽然没有发现协同增强奥拉帕尼作用的化合物，但表明多种化合物诱导了对奥拉帕尼的耐药性，并且这些化合物的靶分子功能的抑制减弱了奥拉帕尼的作用。那此外，由于奥拉帕尼耐药性的获得是一个治疗问题，为了寻找与奥拉帕尼耐药性相关的因素，我们使用从BRCA1敲除癌细胞系中分离的奥拉帕尼耐药性细胞进行了下一代测序，得到了分析结果。并进行通路分析，观察细胞内多个通路基因表达的变化，获得多个与耐药相关的候选基因。