GBPsによるLPS認識が歯周炎ならびに炎症性腸疾患に及ぼす病因的役割の解明

阐明 GBP 识别 LPS 在牙周炎和炎症性肠病中的病因学作用

基本信息

批准号：
22K09951
负责人：
片岡嗣雄
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Asahi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09951/
关键词：
歯周病原細菌 LPS インフラマソーム GBPs 炎症性腸疾患

项目摘要

本年度は、Porphyromonas gingivalis菌体から精製されたLPS（LPS-PG）ならびにP. gingivalisの培養上清から分離した外膜小胞（OMV）を用い、これらがヒト細胞質内でどのように認識されているかについて検討した。細胞質内のLPSは、Caspase 4活性化によって引き起こされるnon canonicalインフラマソーム活性化経路を介してIL-18産生やパイロトーシスを誘導することが明らかになってきているが、P. gingivalisのLPが実際にどのような経路で認識されているかは現在まで不明である。そこで、精製されたLPS-PGをヒト単球系細胞株THP-1ならびにヒト歯肉上皮細胞HSC-2にリポフェクション試薬を用いて導入し、IL-18の産生とパイロトーシスが誘導されるかどうかを調べた。その結果、細胞質内に導入したLPS-PGはIL-18産生とパイロトーシスを誘導しなかったが、導入前の細胞をIFN-γでプライミングすると、これらが誘導されることが示された。この結果は、IFN-γ誘導性因子であるグアニル酸結合タンパク質（GBPs）が細胞質内LPS-PGの認識に関与していることを示唆するものであり、現在はGBPsの役割について解析を進めている。また、P. gingivalisから分離したOMVは、IFNγでプライミングした細胞において、リポフェクション試薬によって細胞質内に導入しなくてもパイロトーシスを誘導した。以上の研究成果は、2022年９月に開催された第65回歯科基礎医学会学術集会にて発表した。

今年，我们使用了从牙龈卟啉单胞菌细胞纯化的LPS（LPS-PG）以及从牙龈斑a培养上清液中分离出的外膜囊泡（OMV），以及在人类细胞质中如何识别这些囊泡。据研究表明，胞质内LPS通过caspase 4激活引起的非经典炎症体激活途径诱导IL-18的产生和凋亡，但迄今为止尚不清楚gingivalis lp实际上是如何识别的。因此，使用Lipofection试剂将纯化的LPS-PG引入人类单核细胞系THP-1和人牙龈上皮细胞HSC-2中，以确定是否诱导了IL-18的产生和热吞作用。结果表明，引入细胞质中的LPS-PG不会诱导IL-18的产生或凋亡，而是用IFN-γ诱导了预感染的细胞。该结果表明，IFN-γ-诱导因子鸟苷酸盐结合蛋白（Gbps）参与了胞质内LPS-PGS的识别，目前正在对GBPS的作用进行分析。此外，从牙龈疟原虫分离的OMV诱导了用IFNγ启动的细胞中的凋亡，而无需通过唇彩试剂引入细胞质。上述研究结果于2022年9月在牙科基础医学协会第65届学术会议上提出。