The role of the lateral hypothalamus in conditioned taste aversion

下丘脑外侧在条件性味觉厌恶中的作用

基本信息

批准号：
22K09912
负责人：
乾賢
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

味覚嫌悪学習の想起における視床下部外側野のグルタミン酸性ニューロンの役割を調べることを目指した．野生型マウスの視床下部外側野にCaMKIIαをプロモーターとするアデノ随伴ウィルスベクターを注入し，興奮性人工受容体であるhM3Dqあるいは抑制性人工受容体であるhM4Diを発現させた．このマウスに人工甘味料であるサッカリン溶液を摂取させた後に体調不良を引き起こす塩化リチウムを腹腔内投与することで味覚嫌悪条件づけを施した．その後，3回のテストを行った．最初のテストではサッカリン溶液を再呈示してマウスが味覚嫌悪学習を獲得していることを確認した．2回目のテストでは，半分の個体には人工リガンドであるdeschloroclozapine（DCZ；50 μg/kg）を投与した（実験群）．残りの個体には溶媒（1%DMSO含有生理食塩水）を投与した（対照群）．投与の30分後にサッカリン溶液を呈示した．3回目のテストでは1回目のテストと同様にサッカリン溶液を呈示した．サッカリン溶液の呈示は全て独自に開発した微細行動分析システムで行った．このシステムでは摂取行動（以降Lickと表記）とシリンジへの接近行動（以降Entryと表記）を記録した．3回以上のLickが180ミリ秒以下の間隔で連続した場合をBurstと定義した．また，1つのBurstに含まれるLickの数をSizeと定義した．嫌悪が強いほどSizeが小さくなる．EntryについてはLickを伴う場合をEntry-Lickとし，Lickを伴わずにマウスがそのまま後退した場合をEntry-Stopと定義した．グルタミン酸性ニューロンの活動を亢進あるいは抑制しても条件刺激の摂取量やBurst sizeに有意な変化はみられなかった．しかし，活動を亢進した場合にEntry-Stop．すなわち摂取を躊躇する行動が有意に増大することが分かった．

我们的目的是研究下丘脑外侧谷氨酸能神经元在味觉厌恶学习记忆中的作用。我们将带有 CaMKIIα 启动子的腺相关病毒载体注射到野生型小鼠的外侧下丘脑中，以表达 hM3Dq（一种兴奋性人工受体）或 hM4Di（一种抑制性人工受体）。通过摄入糖精（一种人工甜味剂）溶液，然后腹腔注射氯化锂，对这些小鼠进行味觉厌恶调节，这会导致健康状况不佳。之后我们进行了三项测试。在第一个测试中，我们重新呈现了糖精溶液，并确认小鼠已经获得了味觉厌恶学习。在第二个测试中，一半的动物被给予人工配体去氯氯氮平（DCZ；50μg/kg）（实验组）。其余动物给予载体（含有1％DMSO的生理盐水）（对照组）。给药后30分钟提供糖精溶液。在第三次测试中，如第一次测试中那样提供糖精溶液。糖精溶液的所有演示均使用独立开发的微生物行为分析系统进行。该系统记录摄取行为(以下称为“舔”)和接近注射器的行为(以下称为“进入”)。突发被定义为以 180 毫秒或更短的间隔连续 3 次或更多舔。我们还将一次连拍中包含的舔次数定义为“大小”。厌恶越强，尺寸越小。对于Entry，当涉及舔时，我们定义Entry-Lick；当鼠标向后移动而没有舔时，我们定义Entry-Stop。即使谷氨酸能神经元的活性增强或抑制，条件刺激摄入或突发大小也没有观察到显着变化。然而，如果活动增加，就会发生 Entry-Stop。换句话说，发现对摄入量犹豫的行为显着增加。