ヒト脂肪幹細胞の陰圧負荷培養を応用した創傷治癒・血管新生効果の解明と応用

负压培养人脂肪干细胞对伤口愈合和血管生成作用的阐明和应用

基本信息

批准号：
22K09898
负责人：
覚道奈津子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kansai Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09898/
关键词：
陰圧 HUVEC 創傷治癒脂肪幹細胞増殖

项目摘要

陰圧閉鎖療法は創傷治癒に有効であることが知られているが、陰圧が組織修復を調節するメカニズムは不明なままである。肉芽組織を形成するためには、血管新生が必須であり、そのためには血管内皮細胞の増殖・遊走が不可欠である。陰圧下での血管新生促進は、創傷治癒を促進する重要なメカニズムであり、NPWT治療の特徴である肉芽組織の形成に重要なパラメータであると思われる。本年度はまず、陰圧によるHUVECの増殖への影響を調べた。プレートに播種したHUVECを密閉容器に入れ、蓋をしっかりと閉めてから、臨床でNPWTに使用されているRENASYS TOUCH (Smith & Nephew Co., Watford, UK) を接続した。密閉容器を37℃の5％CO2インキュベーターに入れた。圧設定を-120mmHgとし、連続的に陰圧をかけた状態で培養した。気圧下で培養した対照群と、陰圧下で培養した細胞の増殖を、CCK-8assayを用いて比較した。その結果HUVECの増殖は、大気圧群と比較して陰圧群で1.2倍に増加した（p < 0.05）。さらに、陰圧下で培養したHUVECのDNA合成をBrdU assayで調べたところ、陰圧処理した細胞のDNAへのBrdUの取り込みはコントロールよりも多かった（p < 0.05）。これらの結果は、陰圧によるDNA合成の増加は、HUVECの増殖と同程度であることを示していた。

已知负压伤口治疗对伤口愈合有效，但负压调节组织修复的机制仍不清楚。为了形成肉芽组织，血管生成是必需的，为此，血管内皮细胞的增殖和迁移是必需的。负压下促进血管生成是促进伤口愈合的重要机制，并且似乎是肉芽组织形成的重要参数，这是NPWT治疗的特征。今年，我们首先研究了负压对 HUVEC 增殖的影响。将接种在平板上的HUVEC置于密封容器中，盖紧盖子，连接临床上用于NPWT的RENASYS TOUCH (Smith & Nephew Co., Watford, UK)。将密封容器置于37℃、5%CO2培养箱中。压力设定为-120mmHg，在持续负压下进行培养。采用CCK-8法比较负压培养的细胞和常压培养的对照组细胞的增殖情况。结果，与常压组相比，负压组的 HUVEC 增殖增加了 1.2 倍（p < 0.05）。此外，当我们使用 BrdU 测定检查负压培养的 HUVEC 中的 DNA 合成时，我们发现负压处理的细胞 DNA 中 BrdU 的掺入量高于对照组（p < 0.05）。这些结果表明，负压导致的 DNA 合成的增加与 HUVEC 的增殖相当。