Development of new molecular targeted therapy for osteosarcoma lung metastasis

骨肉瘤肺转移新型分子靶向治疗的进展

基本信息

批准号：
22K09401
负责人：
中田英二
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09401/
关键词：
悪性骨・軟部腫瘍肺転移増殖 PRRX1 骨肉腫

项目摘要

骨肉腫悪性骨・軟部腫瘍は標準治療として化学療法と手術が行われる。しかし、肺転移に対する化学療法の効果は限られ、極めて予後不良である。近年、分子標的薬が登場しているが、肺転移例の予後改善は困難で、有効な新規治療薬の開発が期待されている。転写制御因子Paired related homeobox 1(PRRX1)は、四肢骨格形成に強く関与しており、その重要性に関する報告も多い。一方で、がんの悪性化への関与も報告されており、我々は骨肉腫において、PRRX1が悪性化促進因子として機能することを明らかにした。そこで、骨肉腫など、悪性骨・軟部腫瘍におけるPRRX1の役割を解明するため、腫瘍の悪性度とPRRX1の発現量の関連性を臨床的に評価し、in vitroにおける機能解析を行った。当院にて手術を行った悪性骨・軟部腫瘍の術後検体にPRRX1の免疫染色を行い、染色強度と染色陽性細胞数から高発現群と低発現群に群分けし、PRRX1の発現とその患者の５年累積生存率、再発・肺転移との関連を評価したところ、免疫染色において、高発現群は低発現群に比べ５年累積生存率が低く、転移率が高かった。in vitroでは、レンチウイルスベクターを用いてPRRX1に対するshRNA(shPRRX1)を複数の肉腫細胞株に導入した。またPiggybac systemを用いてPRRX1をドキシサイクリン依存的に過剰発現させるヒトMPNST細胞株を樹立した。対照群(空ベクター導入群)とshPRRX1導入群間、対照群(ドキシサイクリン未処理群)とPRRX1過剰発現群(ドキシサイクリン処理群)間で増殖能、遊走能、浸潤能を比較した。またshPRRX1導入群では増殖能、遊走能、浸潤能が低下し、PRRX1過剰発現群では増殖能に変化はないが、遊走能、浸潤能が増加していることが分かった。

骨肉瘤是一种恶性骨和软组织肿瘤，其标准治疗方法是化疗和手术。但化疗对肺转移瘤的疗效有限，预后极差。尽管近年来出现了分子靶向药物，但难以改善肺转移病例的预后，期待开发新的有效治疗药物。转录调节因子配对相关同源盒 1 (PRRX1) 与肢体骨骼形成密切相关，并且有许多关于其重要性的报道。另一方面，也有报道称PRRX1参与癌症的恶性转化，我们揭示了PRRX1作为促进骨肉瘤恶性进展的因子发挥作用。因此，为了阐明PRRX1在骨肉瘤等恶性骨和软组织肿瘤中的作用，我们在临床上评估了肿瘤恶性程度与PRRX1表达水平的关系，并进行了体外功能分析。我们对我院手术后的恶性骨与软组织肿瘤标本进行PRRX1免疫染色，根据染色强度和阳性染色细胞数将其分为高表达组和低表达组，并检测PRRX1和PRRX1的表达情况。其在评估患者5年累积生存率与复发/肺转移的关系时，免疫染色显示高表达组比低表达组5年累积生存率较低，转移率较高。在体外，使用慢病毒载体将针对 PRRX1 (shPRRX1) 的 shRNA 引入多种肉瘤细胞系中。我们还使用 Piggybac 系统建立了一种人类 MPNST 细胞系，该细胞系以多西环素依赖性方式过表达 PRRX1。比较对照组(空载体导入组)和shPRRX1导入组、对照组(多西环素未处理组)和PRRX1过表达组(多西环素处理组)的增殖、迁移和侵袭能力。另外发现shPRRX1导入组中增殖能力、迁移能力和侵袭能力下降，而PRRX1过表达组中增殖能力没有变化，但迁移能力和侵袭能力增加。