骨髄・骨細胞MEF2Cの閉経後骨粗鬆症誘導における役割

骨髓/骨细胞 MEF2C 在绝经后骨质疏松诱导中的作用

• 批准号: 22K09366
• 负责人: 仲谷 照代
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Mukogawa Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09366/
• 关键词: MEF2C; RankL; 閉経後骨粗鬆症; 骨髄; 骨細胞

本研究では、閉経に伴うエストロゲン低下が骨細胞または骨髄MEF2C増加を引き起こすことにより、Rankl発現が増加し、破骨細胞の活性化、また骨髄内脂肪、骨形成バランスに影響を与え、骨粗鬆症へと導くという研究仮説を検証するため、マウス骨髄由来間葉系幹細胞(ST2)からの脂肪細胞分化誘導系を用いた機能解析、また骨細胞特異的Mef2cノックアウトマウスの卵巣を摘出することにより閉経後骨粗鬆症モデルとなるマウス(OVX)を用いた機能解析、骨表現型の解析を行う。１．骨髄MEF2Cが破骨、脂肪、骨芽細胞分化に寄与しているか、C/EBPsがMEF2C発現に関与しているか明らかにする。骨髄中には脂肪、骨芽、破骨細胞などの前駆細胞が存在するが、骨髄内脂肪細胞分化の初期段階に必要な転写因子、C/EBPsを介してRANKLの発現が誘導され、脂肪細胞分化と破骨細胞分化のクロストークが示唆された。加齢に伴い骨髄内で脂肪細胞が増加し骨形成が減少する。ST2細胞の脂肪細胞分化誘導系を用いた機能解析：培養条件の検討を行った。具体的には、pcDNA3-Mef2cを細胞にトランスフェクションをし、IBMX, Dex.等の刺激条件下でtime-courseやdose-dependentなどにより培養条件設定の検討。pcDNA3.1mouseC/EBP beta とpcDNA3.Ｃ/EBP deltaプラスミドを購入し、トランスフェクションの準備。２．骨細胞MEF2C増加が閉経後骨粗鬆症に関与しているか否か明らかにする。骨細胞特異的Mef2cノックアウトマウス（骨細胞Mef2c KOマウス）の作製：分担者所属大学での動物実験計画承認を得ることが出来、Jackson labから凍結胚（Mef2c〈tmJjs〉/J_Embryo）が納品され、固体化を行い、Prx1CreとのKOマウスの交配を開始。

在这项研究中，与更年期相关的雌激素的减少会导致骨细胞或骨髓MEF2C增加，增加了RANKL表达，激活骨细胞细胞，并影响骨髓脂肪和骨骼的平衡，并导致骨质疏松。基于小鼠骨髓的中叶干细胞（ST2）的脂肪细胞分化诱导系统的指导性分析（ST2）和术后骨质疏松症的功能分析，通过使用模型小鼠在骨细胞特异性MEF2C敲除小鼠中去除卵巢。 （OVX）和骨表达类型的分析。 1。它阐明了骨髓MEF2C是否有助于骨质疗法，脂肪和骨骼颠簸，还是C/EBP参与MEF2C表达。在骨髓中，有前面的细胞，例如脂肪，骨芽和骨骨质，但是RankL的表达是通过C/EBP诱导的，这对于骨髓脂肪细胞的早期阶段是必不可少的。提出了骨细胞分化。随着衰老的衰老，脂肪细胞的骨髓中增加，骨形成降低。使用脂肪细胞分化诱导ST2细胞的功能分析：检查了培养条件。具体而言，转染是在细胞上用PCDNA3-MEF2C转染，并且在IBMX等刺激条件下，通过时间表，剂量依赖性等进行培养条件。购买PCNA3.1MOUSEC/EBP BETA和PCDNA3.C/EBP DELTA质粒并准备转染。 2。它阐明了产后骨质疏松症中骨细胞MEF2C的增加是否涉及。骨细胞特异性的MEF2C敲除小鼠（骨细胞MEF2C KO小鼠）：可以获得属于单独大学的大学的动物实验计划，杰克逊实验室已经提供了冷冻的胚胎（MEF2C <TMJJS>/j_embryo）并开始使用PRX1CRE越过KO鼠标。