Development of a novel treatment method using umbilical cord-derived mesenchymal stem cells for cerebral hemorrhage and investigation of their mechanism

使用脐带衍生的间充质干细胞开发一种新的治疗方法，用于脑出血和研究其机制

基本信息

批准号：
22K09271
负责人：
吉村紳一
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hyogo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本研究ではコラゲナーゼ脳内投与による脳出血マウスモデルとヒト臍帯由来 MSC (human umbilical MSC: hUMSC) を用いた実験系を立案した。細胞の有効性は網羅的行動試験を用いて多角的に検討する。先行研究により、これらの間葉系幹細胞の投与が、脳出血部ならび周囲のマクロファージおよび (おそらく当該細胞が発現する) TNF-α および iNOS が有意に働くことが示されているため、脳内の炎症抑制に焦点を当てた機序解析を行う予定である。2022年度はhUMSCの効果を網羅的行動試験で確認する予定であった。しかし、hUMSCを今後ヒトへの臨床応用を考えた場合、より適したhUMSCを獲得するため新たな供給元との調整を行った。これにより新たなhUMSCの供給が調整後となったため、今後の研究に必要な予備実験を先行的に行った。まずは、脳出血で急性期の炎症性変化をより捉えられるターゲットと検査法を確立した。具体的には脳出血部位と脾臓でのqPCRを脳出血2日と4日後、つまり我々が投与タイミングと考えられる時期と、8日後に検討した。脳内で特に動いている因子を見つけることができた（具体的な因子名は今後の研究に影響するため非公開）。そして、質量分析で同時期の物質変化を空間情報と共に、検討しqPCRで得られた結果と同様か確認中である。また、hUMSCの効果を検証する行動試験をより効率的に行うために、動物行動試験を主に行っている当施設の別キャンパスで実験遂行の予備実験ならび設備整備・確認を行い、現在半年間程度の一連の実験を進行中である。

在这项研究中，我们使用脑内注射胶原酶和人脐带间充质干细胞（hUMSC）引起的脑出血小鼠模型设计了一个实验系统。将使用综合行为测试从多个角度检查细胞的有效性。先前的研究表明，施用这些间充质干细胞可显着影响脑出血部位的巨噬细胞以及 TNF-α 和 iNOS（可能由这些细胞表达），从而减少大脑中的炎症。抑制。 2022年，我们计划通过全面的行为测试来确认hUMSC的有效性。然而，当考虑到未来hUMSCs在人类中的临床应用时，我们与新的供应商进行了安排，以获得更合适的hUMSCs。因此，调整了hUMSC的新供应，因此提前进行了未来研究所需的初步实验。首先，我们建立了更好地检测脑出血急性期炎症变化的目标和测试方法。具体来说，我们在脑出血后2天和4天（我们认为这是给药时间）和8天后检查了脑出血部位和脾脏的qPCR。他们能够找到一种在大脑中特别活跃的因子（具体因子名称不会透露，因为它将影响未来的研究）。我们还使用质谱和空间信息检查同一时期的材料变化，以确认结果是否与 qPCR 获得的结果相似。此外，为了更有效地进行行为测试以验证hUMSC的效果，在过去的六个月里，我们一直在我们设施的一个单独的园区（主要进行动物行为测试）进行初步实验和设备准备和确认。目前正在进行一系列实验。