小胞体ストレスがテモゾロミドに及ぼす影響

内质网应激对替莫唑胺的影响

• 批准号: 22K09253
• 负责人: 庄田 健二
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09253/
• 关键词: 小胞体ストレス; テモゾロミド耐性; 抗腫瘍作用; 神経膠芽腫

我々は複数の神経膠芽腫（GBM；Glioblastoma)の細胞株（U251、U87、T98G）において、細胞生存試験でElongation factor 2 (elF2)阻害剤であるIntegrated stress response inhibitor (ISRIB)がテモゾロミドの作用効果を増強することを確認した。GBMは遺伝子多型であることが知られているが、異なる細胞株でも併用効果を発揮することが判明し、遺伝子変異が症例ごとで異なる実臨床においても、有用となりうる可能性が考えられた。またelF2は小胞体ストレスによってリン酸化されるが、ウエスタンブロッティングにより、ISRIBの投与がGBM細胞株のelF2のリン酸化が阻害されることを確認した。これによりISRIBがGBMの小胞体ストレスによる反応を阻害していると考えられた。今後は投与時間によるelF2のリン酸化の変化を評価し、作用が最も増強する時間を評価する予定である。小胞体ストレスによって生じるActivating transcription factor (ATF)4が腫瘍血管の新生を促すことで腫瘍の増殖を促進させ、さらにテモゾロミドの抗腫瘍効果を減弱させることが報告されている。elF2のリン酸化もATF4を活性化させるとされ、ISRIBの投与によるATF4およびATF4によって発現が増加する抗酸化応答因子の変化を評価している。また当研究室においてはマウスのGBM細胞株(GL261)を使用したGBM移植マウスモデルの作成手技は確立しており、そのモデルを使用した論文を発表している。今後はIn vivoにおいてISRIBの作用効果を検討する予定であり、現在投与量および投与方法を検討中である。

我们证实，在细胞存活研究中，延伸因子2（ELF2）抑制剂的综合应激反应抑制剂（ISRIB）增强了替莫唑胺在多个胶质母细胞瘤细胞系（U251，U87和T98G）中的作用和作用。尽管已知GBM是一种遗传多态性，但发现它与不同的细胞系有效，并且人们认为它在遗传突变因情况下的实际临床情况下可能很有用。此外，ELF2被内质网应激磷酸化，但蛋白质印迹证实，ISRIB的给药抑制了GBM细胞系中ELF2的磷酸化。这表明ISRIB抑制因内质网应激引起的GBM引起的反应。将来，我们将评估由于给药时间而导致的ELF2磷酸化的变化，并评估效果最具增强的时间。据报道，由内质网应激引起的转录因子（ATF）4通过促进肿瘤血管肿瘤血管发育促进肿瘤生长，并减轻替莫唑胺的抗肿瘤作用。据说ELF2的磷酸化也可以激活ATF4，并且正在评估抗氧化剂反应因子的变化，这些因子会在施用ISRIB时增加ATF4和ATF4的表达。此外，我们的实验室已经建立了一种使用小鼠GBM细胞系（GL261）创建GBM移植小鼠模型的技术，并已发表了使用该模型的论文。将来，我们计划研究Isrib在体内的影响和影响，目前正在考虑使用剂量和给药方法。

项目成果

岐阜大学医学部脳神経外科

岐阜大学医学院神经外科