臍帯間葉系幹細胞を用いた先天性横隔膜ヘルニアの低形成肺に対する新規治療の開発

利用脐带间充质干细胞开发治疗先天性膈疝引起的肺发育不良的新疗法

• 批准号: 22K08726
• 负责人: 新開 統子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08726/
• 关键词: 臍帯間葉系幹細胞; 肺低形成; 先天性横隔膜ヘルニア; 肺高血圧; 再生医療; 器官培養

R4年度は研究責任者の異動があり、実際に研究を開始できたのはR5年の4月からとなった。そのため、実験の開始が想定より大幅に遅れている。ただし、異動先の研究室は細胞培養実験の設備が整っており、培養細胞を用いた実験を安定的に行う環境が整っている。今年度の研究成果の具体的内容：本研究で用いる臍帯間葉系幹細胞を継代培養することから開始した。臍帯間葉系幹細胞はPromoCell社から購入し、専用の無血清培地を用いた。しかしながら、臍帯間葉系幹細胞は接着性が弱炒め、フィブロネクチンコーティングの培養器を必要とした。今回フィブロネクチンコーティングフラスコを用いなかったために、臍帯間葉系幹細胞を増やして継代していくことができなかった。浮遊した幹細胞は約2週間で直径1mm以上のspherocyteのように増大した。当初、培養液の交換は週に2回で行なったが、最後の週は週1回にとどめたが、そのためか幹細胞の増大が顕著となった。今回使用している幹細胞の培養では、週1回の培地替えが妥当である可能性が考えられた。重要性：細胞はそれぞれ特徴があり、培養環境は一定でない。細胞の特徴をよく理解することが重要である。現在、フィブロネクチンコーティングの培養器を購入して、再度臍帯間葉系幹細胞を継代培養を行う予定である。今後、臍帯間葉系幹細胞の継代においては、培地交換の頻度を週1回程度にとどめることが、細胞の成長に適しているものと考えられた。

在FY1，R4中，研究人员的流动性，正是在R5的4月，这项研究实际上就开始了。因此，实验的开始显着落后于预期。但是，目的地的实验室配备了细胞培养实验，并且在其中稳定地进行了使用培养细胞实验的环境。今年研究结果的特定含量：首先继续培养本研究中使用的脐带干细胞。脐带是从Promocell购买的，并使用了专用地球仪介质。但是，脐带叶的干细胞具有较弱的粘附性，需要纤毛素涂层。这次，由于纤连蛋白涂料瓶没有使用，因此不可能增加脐叶基细胞的数量。浮动干细胞像球形细胞一样增加，直径在大约两周内为1毫米或更多。最初，每周进行两次培养溶液的替代，但上周仅进行一次，因此干细胞的增加是显着的。在这段时间的干细胞培养物中，人们认为每周一次适合改变培养物。重要的是：每个细胞都有其自身的特征，并且文化环境不是恒定的。很好地了解细胞的特征很重要。目前，我们计划购买纤酮凝结蛋白涂层培养物，并再次恢复脐带干细胞。将来，在连续的脐带干细胞中，被认为培养基替代的频率被设置为每周大约一次，这适用于细胞生长。