肺マイクロバイオームの変容と自然免疫応答異常に注目したIPF病態の解明

阐明 IPF 病理学，重点关注肺部微生物组的变化和异常的先天免疫反应

基本信息

批准号：
22K08234
负责人：
千葉弘文
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本研究は、1) 肺マイクロバイオームのディスバイオシス、2) 自然免疫応答異常、3) 線維芽細胞の遊走・増殖、これらの病態を結びつけるIPFの新たな病態仮説の検証を目標としている。IPF患者のBALFを用いたマイクロバイオーム解析と患者特徴や予後との関連の検討。肺線維症モデルマウスを用いたマイクロバイオームの検討。肺線維症モデルマウスから単離したマクロファージ等を用い、PAMPsに対する反応変化等のvitroでの解析。肺内自然免疫に重要な役割を担うSP-Aノックアウトマウスでのマイクロバイオーム解析等を計画している。これまでの進捗状況として、IPF患者のBALF中のDNAを抽出し、細菌の16S rRNAを増幅・精製し、Ion Torrentのプラットフォームを用いて、菌種の同定を行った。結果、線維化の進行（呼吸機能検査でFVCの有意な低下）および急性増悪を含む早期死亡した患者の肺マイクロバイオームの特徴として、Firmicutes門、なかでもStreptococcaceae科の増加がみられる症例でFVCの低下、すなわち疾患の進行が認められ、早期死亡群では、マイクロバイオームの多様性の低下が示された。我々は、線維症モデルを作成し、肺マイクロバイオームの解析を行った。結果、正常なマウスと比較して、マイクロバイオームの多様性が失われ、フィルミクテス門の増殖とプロティオバクテリア門の減少という、IPF患者と極めて近似したディスバイオシスが起きていることを確認した。その後、肺内の自然免疫において重要な役割を担う、SP-Aをノックアウトしたマウスでは、野生種と比べマイクロバイオームに変容が生じることが分かった。さらに詳細を検討中である。

这项研究旨在验证连接这些病理学的IPF的新路径假设，1），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2），2）），2），3），3）成纤维细胞，迁移和生长。使用IPF患者BALF以及患者特征和预后检查微生物组分析。使用肺纤维化模型小鼠检查微生物组。在体外分析，例如使用巨噬细胞从肺纤维化模型小鼠中分离出来的巨噬细胞的反应变化。我们正在计划使用SP-A基因敲除小鼠进行微生物组分析，这些小鼠在肺免疫中起着重要作用。作为进步，提取，放大和纯化了IPF患者的BALF中的DNA，并纯化了16S rRNA的细菌，并使用离子洪流平台鉴定出细菌物种。结果，在纤维化进展（FVC的呼吸功能中的大幅下降）和急性加剧的情况下，在企业链球菌的增加（尤其是链球菌部门）的情况下，蛋白质的数量，尤其是链球菌的数量衰落，即疾病的进展得到了认可，在早期死亡组中，微生物组的多样性减少了。我们创建了一个纤维化模型并分析了肺微生物组。结果，已经证实，与正常小鼠相比，微生物的多样性丢失了，并且IPF患者发生了非常紧密的盘中，例如电影摄影机的生长和Proteio的减少细菌门。后来，发现与野生物种相比，一只在肺部自然免疫中起着重要作用的小鼠SP-A在肺部自然免疫中起着重要作用。我们正在考虑更多细节。