安定供給を可能にする重症ウイルス感染症疾患モデルマウス作製の新技術開発

开发严重病毒感染小鼠模型制作新技术，实现稳定供应

• 批准号: 22K07880
• 负责人: 石川 百合子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: National Center for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07880/
• 关键词: Epstein-Barr virus; CAEBV; ヒト化マウス; EBV感染細胞株; 薬効モデル; EBウイルス; 細胞株

ヒトB細胞指向性のEpstein-Barr ウイルス（EBV）がT細胞やNK細胞に感染した場合、難治性のEBV関連リンパ増殖性疾患(EBV-LPD)を発症することがある。EBV-LPDに分類される慢性活動性EBV感染症（CAEBV）の根治療法は造血幹細胞移植のみである。しかし造血幹細胞移植は侵襲の大きな治療法であり、またドナーの確保や合併症リスクといった問題があるため、移植に代わるCAEBV治療薬の開発が急務である。CAEBV治療薬の開発において、EBVはヒト細胞指向性であるため薬効試験にマウスなどの小動物を利用できない。これまでCAEBV治療薬の薬効モデルは、CAEBV患者由来の末梢血単核球(PBMC)を超免疫不全マウス(NOGマウス)に移植することによって作製してきた。しかし、従来のモデル作製は患者検体の入手状況に左右される問題があった。そこで本研究は、安定して大量に作製できる、EBV感染細胞株を用いた薬効モデルの作製を目的とした。PBMCとは異なり、CAEBV患者由来EBV感染細胞株はNOGマウスに生着しなかった。我々はTおよびNK細胞の増殖因子であるInterleukin-2 (IL-2) が、NOGマウスにおける細胞株の生着を促進する因子であると推測し、ヒトIL-2を細胞株を移植したNOGマウスの腹腔内に連日投与したところ、細胞株の生着が認められた。さらに、恒常的にヒトIL-2を発現するNOGマウス、NOG-hIL-2 Tgマウスにおける細胞株の生着が認められた。現行のCAEBV治療に使用されている抗悪性腫瘍剤を用いた薬効試験を行うことによって、本モデルの薬効モデルとしての妥当性を確認した。よって本研究において、CAEBV治療薬の新規薬効モデルとなる、EBV感染細胞株異種移植モデルの作製法を開発することができた。

如果以T细胞和NK细胞感染了面向人类B细胞的EPSTEIN-BARROVIRUS（EBV），则可能会发展出可治欲的EBV相关淋巴增殖性疾病（EBV-LPD）。慢性活性EBV感染（CAEBV）的唯一根源治疗分类为EBV-LPD，是造血干细胞移植。然而，造血干细胞移植是侵入性侵入性的主要治疗方法，存在诸如保护供体和并发症的风险之类的问题，因此迫切需要CAEBV治疗而不是移植的发展。在CAEBV疗法的发展中，由于EBV是面向人类细胞的，因此无法将EBV使用小鼠（例如小鼠）进行药物检查。到目前为止，通过移植源自CAEBV患者到超级免疫缺陷小鼠（NOG小鼠）的外周血核球（PBMC）来产生CAEBV治疗的药物效应模型。但是，存在一个问题，即传统模型被确定为患者标本的状态。因此，这项研究旨在使用EBV感染的细胞库存生成药物效应模型，该模型可以稳定且大量生产。与PBMC不同，来自CAEBV患者的EBV感染的细胞量未生活在Nog小鼠上。我们估计，T和NK细胞中的介体-2（IL-2）是促进NOG小鼠中细胞共享的因素，并在小鼠的每天在小鼠的每天施用时，都会在小鼠中施用。允许腹腔，允许细胞。此外，观察到了不断表达人IL-2的NOG-HIL-2 TG小鼠中的细胞共享。该模型作为该模型的药物效应模型的有效性通过使用当前CAEBV治疗中使用的抗马利乳腺肿瘤进行药物测试证实。因此，在这项研究中，我们能够开发一种创建EBV感染的细胞股东移植模型的方法，这是CAEBV治疗的新药物效应。

项目成果

慢性活動性EBウイルス感染症(CAEBV)患者由来細胞株を用いたCAEBVマウス異種移植モデルの作製

使用源自慢性活动性 EEB 病毒感染 (CAEBV) 患者的细胞系生成 CAEBV 小鼠异种移植模型

• 发表时间: 2022
• 作者: 永井悠太;松本浩;星野柚紀;仁紙千尋;鈴木秀一;浅野貴子;西野桂佑;栗岡隆臣;見越綾子;野々山恵章;三浦沙也伽
• 通讯作者: 三浦沙也伽