Investigation of virus RNA analysis using FFPE specimens to clarify the pathogenesis of acute rupture of chodae tendineae of the mitral valve in infants

FFPE标本病毒RNA分析阐明婴儿二尖瓣腱腱膜急性破裂的发病机制

• 批准号: 22K07883
• 负责人: 黒嵜 健一
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07883/
• 关键词: 乳児特発性僧帽弁腱索断裂; 腱索断裂; 急性心不全; 抗SSA抗体; 川崎病; 心内膜炎; ウイルス

乳児特発性僧帽弁腱索断裂における僧帽弁および腱索の心内膜には、単核球を中心とした炎症細胞浸潤が認められ(Shiraishi et al., Circulation 2014;130:1053)、病因としてウイルス感染、川崎病、母親由来の抗SSA抗体などが示唆されている。本疾患は発症が年間10数例と希少で、また搬送直後に手術に向かうために、病因解明のための新鮮サンプルの収集が困難である。そこで我々は、過去の病理組織標本から最新の遺伝子工学的手法を駆使して、本疾患の病態と病因解明を試みた。[対象と方法]僧帽弁置換した腱索断裂乳児４例(断裂群：生後3-6ヶ月(中央値4ヶ月)、川崎病およびSSA抗体陽性例を除く)と弁置換した先天性心疾患２例(対照群：生後11および13ヶ月)のパラフィン包埋された僧帽弁および腱索標本の切片を高感度ISH法にて解析した。[結果]前回の研究で行った病原微生物の検索を目的としたメタトランスクリプトーム解析では、断裂群４例中２例に小児に一般的な感染症を引き起こすDNA virus Xに高い相補性が検出された。そこで今回は、高感度ISH法(RNAscope)を行ったとところ、断裂群の組織片に心内膜を主体とするDNAvirus X（未発表にてXとする）のRNAシグナルが確認された。[考察]本疾患では僧帽弁および腱索に何らかの炎症と免疫応答が存在すること、引き金として、一般的に小児に発疹と感冒症状をきたすDNAvirus Xが関与することが示唆された。今後は患者の入院時の血液や咽頭拭い液などの新鮮なサンプルを解析し、virus Xの関与を検証する予定である。

炎性细胞浸润，主要是单核细胞，已经在二尖瓣和心内膜中观察到了婴儿的特发性二尖瓣和弦的和弦和弦的和弦的和弦的和弦的和弦的和弦（Shiraishi等人，Shiraishi等人，2014年循环; 130; 130; 130; 130; 130; 130;抗SSA抗体。这种疾病的发作很少见，每年有10例，并且由于该疾病在运输后立即接受手术，因此很难收集新鲜样本来确定疾病的原因。因此，我们尝试使用过去的组织病理学标本的最新基因工程方法来阐明该疾病的病理和病因。 [受试者和方法]从四个具有二尖瓣更换的婴儿的二尖瓣和和弦标本的部分（传播组：3-6个月（中位4个月）（中位数4个月）和两个先天性心脏病（对照组：11和13个月）使用瓣膜替换组：11和13个月的方法[11和13个月），使用了一个方法，使用了一个方法。在先前的研究中进行的元转录组分析旨在寻找致病性微生物，在泪液组中有两个案例中的四个情况下，DNA病毒X中的互补性很高，因此，当我们在这段时间内导致了高度敏感性的ISH方法（RNAVERS），这是在这段时间内引起的。在撕裂组的组织碎片中，有人建议在该疾病的二尖瓣和合唱肌腱中有一些炎症和免疫反应，而DNAVIRUS X通常会导致儿童皮疹和冷症状。将来，我们计划在住院时分析新鲜样品，例如血液和咽湿巾，以验证病毒X的参与。