Crohn病の腸内細菌叢と局所サイトカインに基づく生物学的製剤の選択基準の確立

建立基于克罗恩病肠道微生物群和局部细胞因子的生物制剂选择标准

• 批准号: 22K06758
• 负责人: 半田 修
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kawasaki Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06758/
• 关键词: クローン病; 腸内細菌; 酪酸産生菌; 腸管局所サイトカイン; 生物学的製剤; 粘膜関連細菌叢; サイトカイン; バイオマーカー

原因不明難病であるCrohn病は、腸管粘膜の全層性炎症を生じ、著しく生活の質が低下するだけでなく、腸管狭窄合併症等により頻回の外科的手術を要する。そのため発症早期からの炎症のコントロールが非常に重要である。近年、新規の生物学的製剤が数種類登場したが、その選択基準が確立されていないことが問題となっている。本研究ではCrohn病において、生物学的製剤投与前の粘膜関連細菌叢(Mucosa- associated/adherent Bacteria, MAM)と腸管粘膜内のサイトカインを測定し、生物学的製剤 有効性のバイオマーカーを確立することを目的としている。内視鏡下にブラシで採取した回腸粘液はDNAを抽出後、16srRNA遺伝子のV3-4領域を増幅してIlumina社製Miseqによりシーケンス解析を実施した。QIIMEを用いて微生物の属レベルまでの同定を行い、細菌構成比、多様性について検討した。対象はCrohn病患者39例（F:M=14：25、平均年齢38.1歳）健常対照者23例（F:M=15：7平均年齢56.1歳）。Crohn病群は対照群と比較して菌の多様性はα、β共に有意に低下していた。Crohn病群内の比較では狭窄あり群ではCoprococcusが有意に低下しており、手術歴あり群ではDorea、Oscillospira、Coprococcusが有意に低下、Veillonellaが有意に増加していた。病型別の比較では小腸型＜小腸大腸型＜大腸型の順に有意にFaecalibacteriumが増加していた。この結果は第60回日本小腸学会学術集会で発表した。また、内容についてはRedox Report誌に投稿中である。今後、MAMと同時採取している小腸局所粘膜のサイトカイン測定を行い、生物学的製剤投与が有効であった群と無効であった群との群間比較を行い、効果予測に役立てたい。

克罗恩病是一种未知的顽固性疾病，会引起肠粘膜的全厚度炎症，导致生活质量的显着下降，并且由于肠道狭窄的并发症而需要经常进行手术手术。因此，从发作的早期阶段控制炎症非常重要。近年来已经出现了几种新的生物剂，但是这些剂的包含标准已成为一个问题。这项研究旨在在肠道粘膜中确定粘膜相关/粘附细菌（MAM）和细胞因子在克罗恩病中生物剂之前，并建立生物学有效性的生物标志物。在使用内窥镜下使用刷子收集的卵形粘液中提取DNA后，放大了16sRRNA基因的V3-4区域，并使用iLumina Miseq进行了序列分析。 Qiime用于鉴定到属水平的微生物，并检查了细菌组成和多样性。受试者是39例克罗恩病患者（F：M = 14：25，平均年龄38.1岁）和23例健康对照（F：M = 15：7平均年龄56.1岁）。与对照组相比，克罗恩病组的细菌多样性显着降低了细菌多样性。克罗恩病组中的比较显示狭窄组的cocrococcoccccoccocccocccoCCOCCCS明显降低，而DOREA，振荡性和cococcoccus则显着降低了，手术组的Veillonella显着增加。在疾病类型的比较中，小肠<小肠大肠<大肠型<大肠类型的小肠的顺序显着增加了粪便裂。这些结果是在日本小肠协会的第60届学术会议上提出的。目前，该内容已发布到Redox Report杂志上。将来，我们将测量小肠局部粘膜上的细胞因子，这些肠与MAM同时收集，并比较生物学剂有效和无效的人之间的组，并使用它来预测有效性。

项目成果

クローン病患者における粘膜関連細菌叢の解析

克罗恩病患者粘膜相关菌群分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 半田 修;大澤元保;松本正憲;松本啓志;井上 亮;内藤裕二;梅垣英次;塩谷昭子
• 通讯作者: 塩谷昭子