逆相HPLC-UV法で行う親水性抗生物質分析－水環境中抗生物質動態調査－

使用反相 HPLC-UV 方法分析亲水性抗生素 - 水环境中抗生素动力学的研究 -

• 批准号: 22K05948
• 负责人: 健名 智子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Toyama Institute of Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05948/
• 关键词: 親水性化合物; HPLC-UV法; 金属イオン; 親水性抗生物質; 逆相カラム

本研究課題は，汎用的な逆相カラムを用いて親水性の抗生物質を選択的かつ高感度に分析する高速液体クロマトグラフ(HPLC)法を開発し，水環境中での動態を解析することを目的とする。申請者らはこれまでに，分子内にカルボキシル基やヒドロキシル基を持つ高親水性化合物をオンラインで金属イオンと配位させることにより， HPLC-UV法により分析する方法を開発してきた。紫外/可視領域に特異な吸収を持たないが分子内に金属イオンと錯化合物を形成しうる構造を持っている抗生物質の，金属イオンとの錯体形成を利用した高選択的HPLC-UV法を開発することができれば，使用量の多い抗生物質の水環境中の濃度のモニター法として有用と考えられる。親水性抗生物質は分子内にカルボキシル基やヒドロキシル基のほかアミノ基を持っている。研究初年度である本年度は，アミノ基を持つ化合物の金属イオンとの配位によるHPLC-UV法による分析法の開発を試みた。エチレンアミン類は特異的な吸収をほとんど持たないことから，これまでは蛍光誘導体化後HPLC-FL法により分析されてきた。しかしながら，この方法には煩雑な前処理，高価な誘導体化試薬や蛍光検出器が必要となる等の点で汎用性や簡便性に課題があった。移動相に銅イオンを添加し，4種のエチレンアミン類をオンラインで銅イオンと配位させ，HPLC-UV法で一斉分析する方法の確立を目指した。銅濃度とpHを調整することにより，4種のエチレンアミン類は銅錯体を形成した。また，これら銅錯体はイオンペア試薬を用いることで逆相カラムへの保持が可能となり，イオンペア試薬とアセトニトリル濃度を最適化することで，4種のエチレンアミン類を逆相イオンペアHPLC-UV法で分離・検出することができた。

该研究主题是开发高性能液相色谱法（HPLC）方法，该方法使用通用反向相位柱有选择地并敏感地分析亲水性抗生素，并在水性环境中分析动力学。申请人先前已经开发了一种方法，用于通过使用HPLC-UV方法在线与金属离子在线协调高度亲水性化合物与分子中的羧基或羟基。如果可以开发一种高度选择性的HPLC-UV方法，该方法利用与抗生素的金属离子形成，在紫外线/可见区域中没有特定的吸收，但具有可以在分子中与金属离子形成复杂化合物的结构，它被认为是一种用于监测抗生素浓度的方法，它们是在大量水中使用的方法。亲水性抗生素的分子中有氨基，以及羧基和羟基。今年是研究的第一年，我们试图使用HPLC-UV方法开发一种分析方法，其中具有氨基组的化合物与金属离子协调。由于乙烯胺几乎没有特异性吸收，因此在荧光衍生化后通过HPLC-FL方法对其进行了分析。但是，该方法在多功能性和便利性方面存在问题，因为它需要复杂的预处理和昂贵的衍生化试剂和荧光探测器。目的是建立一种通过将铜离子添加到流动阶段，在线协调四种类型的乙烯胺与铜离子在线协调四种类型的铜离子，并使用HPLC-UV方法一起分析它们。通过调节铜浓度和pH，四个乙烯胺形成铜配合物。此外，通过使用离子对试剂，可以将这些铜配合物保存在反向相柱上，并且通过优化离子对试剂和乙腈浓度，可以通过反向相位的IOM IOM IOM IOM IOM IOM ION PAIRE HPLC-UV方法分离和检测四种类型的乙烯胺。