ウイルス性呼吸器感染症予防に向けた口腔細菌叢によるポルフィリン類産生機構の解明

阐明口腔菌群产生卟啉预防病毒性呼吸道感染的机制

• 批准号: 22K10354
• 负责人: 高橋 一也
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10354/
• 关键词: 口腔細菌; ウイルス性呼吸器感染症; ポルフィリン; 細菌叢; ポルフィリン類

インフルエンザウイルスやSARSコロナウイルス２（SARS-CoV-2）は，呼吸器由来の飛沫や濃厚接触により感染し，主に呼吸器の疾患を引き起こす．様々な慢性疾患をもつ高齢者は，特に肺炎，多臓器不全などの重篤な疾患を発症するリスクが高くなるため，ウイルス感染に対する効果的で安全性の高い予防法や対処法の開発が待たれている．これらの感染阻害物質として，プロトポルフィリンIXやヘムなどのポルフィリン類，またその代謝経路の上流に位置する５-アミノレブリン酸（5-ALA）が注目されている．最近，我々は舌苔をin vitroで培養した際，培養液に5-ALAを添加すると細菌コミュニティーからポルフィリン類が産生されることを見出した．本研究は，これまでほとんど明らかになっていない口腔細菌叢によるポルフィリン類産生について，個々の細菌種と細菌叢という異なるレベルを対象とした解析を高精度に並行して実施することにより，口腔内で起っている代謝機構の特性を解明するものである．2022年度は，同意の得られた5名の被検者の唾液，舌苔，歯肉縁上および歯間プラークより，嫌気条件あるいは好気条件下で50株以上口腔細菌を分離した．それぞれの分離株について水溶性テトラゾリウムWST-8を用いたMicrobial Viability Assay Kit-WST（Dojindo）で総細菌数を揃え，5-ALA（0.5%[w/v]）を添加したM17培地（Difco）に接種した．インキュベート後，Heme-PPIX-screen法を用いて培養液中のポルフィリン類の有無および濃度を測定した．現在，16S rRNA全長配列の解読に向けて準備を進めているところである．

流感病毒和SARS冠状病毒2（SARS-COV-2）感染了呼吸道或丰富的接触，主要是呼吸道疾病。尤其是各种慢性疾病的老年人有肺炎和多器官衰竭等严重疾病的风险，因此他们一直在等待开发有效，安全的预防和病毒感染的措施。位于代谢途径上游的polphillin（5-ALA）引起了这些感染抑制剂的注意。最近，当在体外培养舌涂层时，我们发现卟啉是从细菌群落中产生的，当将5-ALA添加到培养溶液中时。在这项研究中，关于不同水平的单个细菌物种和细菌菌群的口腔与高精度分析并联有关斑岩蛋白的产生，到目前为止，这几乎没有揭示出来。发生的机制。在2022财年，在厌氧或开朗的条件下分离了50多种口腔细菌，与唾液，舌头苔藓，金吉瓦和牙块相比，获得了五个受试者。每个分离库存是M17培养基（DIFCO），总数量（Dojindo）使用水溶性四唑WST-8，含量为5-ALA（0.5％[W/V]）。孵化后，使用血红素彩色屏幕方法测量培养溶液中卟啉的存在和浓度。我们目前正在准备16S rRNA总长度阵列的解密。