骨指向性を有する新規変形性関節症治療薬の創薬研究

骨向性骨关节炎新疗法的药物发现研究

基本信息

批准号：
21K12694
负责人：
高橋達雄
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hokuriku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

変形性関節症変形性関節症（OA）は高齢者に好発する慢性の関節疾患であり、関節機能の低下をもたらすためQOL低下の大きな要因となっている。本研究の目的は、関節軟骨の修復作用を有する疾患修飾性OA治療薬を創製し、軟骨細胞培養系およびOAモデルマウスを用いてその有効性を立証することである。フラバノン誘導体の1つであるリクイリチゲニンは、軟骨前駆細胞（ATDC5細胞）に作用して軟骨基質の構成成分であるグリコサミノグリカン、アグリカン、Ⅱ型コラーゲンの産生を濃度依存的に増加させた。リクイリチゲニンは、細胞増殖に関わるAkt及びERKのリン酸化を増加させて細胞増殖を促進させたが、軟骨細胞の分化には影響を与えなかった。リクイリチゲニンは、エストロゲン受容体を活性化することが確認され、また上記の作用はエストロゲン受容体（ER）のアンタゴニストであるフルベストラントによって抑制されたことから、リクイリチゲニンはエストロゲン受容体を介して軟骨細胞の増殖とそれに伴う軟骨基質の産生を増加させることが明らかとなった。構造活性相関を検証した結果、フラバノンのA環の7位もしくは6位の水酸基、B環の4'位の水酸基を有する化合物が軟骨細胞に対する増殖作用が最も強かったため、リクイリチゲニン（4',7-dihydroxyflavanone）を疾患修飾性OA治療薬の候補化合物として使用することとした。OAモデルとして半月板不安定化（DMM）マウスを作製し、リクイリチゲニンを1日1回、4週間にわたり経口投与した。その後、後肢の薄切切片を作成してサフラニン染色の結果をスコア化（OARSIスコア）することで治療効果を評価した。DMMマウスのOARSIスコアは高値を示したが、高用量（30 mg/kg）のリクイリチゲニンを投与することによってOARSIスコアを有意に低下させることが確認された。

骨关节炎骨关节炎（OA）是一种常见于老年人的慢性关节疾病，由于其导致关节功能下降，是降低生活质量的主要因素。本研究的目的是创造一种对关节软骨具有修复作用的缓解疾病的 OA 治疗剂，并使用软骨细胞培养系统和 OA 模型小鼠证明其有效性。甘草素是黄烷酮衍生物之一，作用于软骨祖细胞（ATDC5 细胞），以浓度依赖性方式增加软骨基质成分糖胺聚糖、聚集蛋白聚糖和 II 型胶原的产生。甘草素通过增加参与细胞增殖的Akt和ERK的磷酸化来促进细胞增殖，但对软骨细胞分化没有影响。甘草素被证实可以激活雌激素受体，而雌激素受体（ER）拮抗剂氟维司群可以抑制上述作用，从而增加软骨的增殖和软骨基质的产生。验证构效关系的结果是，黄烷酮A环7位或6位具有羟基、B环4'位具有羟基的化合物对软骨细胞的增殖作用最强。二羟基黄烷酮）作为缓解疾病的 OA 治疗的候选化合物。建立半月板失稳（DMM）小鼠作为 OA 模型，每天口服甘草素一次，持续 4 周。此后，通过制备后肢薄片并对番红染色结果进行评分（OARSI评分）来评估治疗效果。尽管DMM小鼠的OARSI评分较高，但已证实给予高剂量（30mg/kg）甘草素显着降低了OARSI评分。