新技術の融合によるDAMPs・ヒストンの細胞内での分解に挑戦する

通过融合新技术应对 DAMP 和组蛋白细胞内降解的挑战

• 批准号: 21K19544
• 负责人: 川原 幸一
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Osaka Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19544/
• 关键词: 敗血症; DAMPs; ヒストン; シノビオリン; ユビキチン; PROTAC; フェノールポリマー

敗血症の病態の進展には、Damage Associated Molecular Patterns（DAMPs、ダンプス）の封じ込めが必須である。DAMPsとは、細胞の活性化・細胞死より、細胞外へ放出される分子の中で、生体にとって有害な分子を言う。具体的な分子には、ヒストンH2A、H2B、H3、H4などがある。これらは細胞外では、ヒストンH2A、H2Bにおいては、炎症性サイトカイン(インターロイキン(IL)-6、IL-8、腫瘍壊死因子(Tumor Necrosis Factor(TNF- alpha))産生能、ヒストンH3、H4では、血栓誘導や生体を致死に向かわせる機能を有している。これらの機能から生体致死を免れるには、DAMPsが細胞質内に留まっているうちに分解し、細胞外への放出を抑制することが最も有 効な方法である。しかしながら、細胞外への放出抑制は、未だに開発されていない。我々は、細胞内の小器官・小胞体に存在するE3ユビキチンリガーゼ、すなわちシノビオリンを単離・精製している。したがって、本研究の目的は、シノビオリンとヒストンを結合させ、分解を行うことである。2022年度は、シノビオリンタンパク質とヒストン（H2A、H2B、H3、H4）との結合をファーウェスタン法を用いて確認を行った。その結果、すべてのヒストンとの結合を確認した。しかしながら、低濃度での検討を行っていないため、さらなる検証が必要である。また、シノビオリンの基質になるかを検討したが、残念ながら、確固たる結論に至らなかった。

遏制损伤相关分子模式 (DAMP) 对于脓毒症病理学的进展至关重要。 DAMP 是对生物体有害的分子，在细胞激活和细胞死亡过程中从细胞中释放出来。具体分子包括组蛋白 H2A、H2B、H3 和 H4。在细胞外，组蛋白H2A和H2B有能力产生炎症细胞因子（白细胞介素（IL）-6、IL-8和肿瘤坏死因子（TNF-α）），组蛋白H3和H4有能力产生炎症细胞因子（白介素（IL）-6、IL-8和肿瘤坏死因子（TNF-α）），从而避免由于这些功能的致命性，DAMPs 必须在其保留在细胞质中并被抑制释放到细胞外时被降解。然而，抑制其在细胞外释放的方法尚未开发出来。我们已经分离和纯化了E3泛素连接酶Synoviolin，它存在于细胞内的细胞器和内质网中，因此，本研究的目的是结合Synoviolin和组蛋白并降解。滑膜蛋白。使用远西方方法确认了蛋白质与组蛋白（H2A、H2B、H3、H4）之间的结合。但是，由于尚未测试，因此需要进一步验证。此外，我们还调查了是否与所有组蛋白结合。可能是滑膜素的底物，但不幸的是我们无法得出明确的结论。