臓器嗜好性に焦点をあてた食道癌転移の分子機序解明からの創薬研究

基于阐明食管癌转移分子机制并关注器官偏好的药物发现研究

• 批准号: 21K19525
• 负责人: 小寺 泰弘
• 金额: $ 3.99万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19525/
• 关键词: 食道癌; 血行性転移; リンパ節転移; Transcriptome解析; コンパニオン診断

食道癌転移経路特異的Transcriptome解析により、血行性転移群とリンパ行性転移で発現パターンが明瞭に異なるクラスターがあることが示され、血行性転移関連分子およびリンパ行性転移関連分子を厳選している。本研究では、これら食道癌転移形式別関連分子の機能解析・発現解析を行うことで、食道癌転移の分子生物学的機序の解明を通じ、新規分子標的治療薬とその奏効度を事前に予測しうるコンパニオン診断法開発の基盤となるデータを得ることを目的としている。前年度までは、臨床的重要度の高い血行性転移に関連する分子として、NECAB2を第一候補に解析を進めてきた。前年度にはsiRNAを用いたノックダウン実験系による機能解析、多施設共同研究体制による発現解析を進めてきた。令和4年度の主な成果として、以下のデータを取得した。NECAB2の人工的発現抑制により、caspase3/7活性の亢進、細胞周期G0/G1期の増加を認めた。これらは細胞増殖能阻害活性の機序を説明しうるものとなる。NECAB2を発現ベクターで強制発現することにより、癌細胞増殖能が亢進した。Western blotting法による細胞内シグナルの解析では、NECAB2を抑制することにより細胞周期調節因子のcyclin D1, CDK2のリン酸化が低下することを発見した。さらに、NECAB2抑制により食道癌細胞の血管内皮への接着能が低下することを見出した。これは、NECAB2が血行性転移に特異的に作用することの機序解明として重要なデータとなる。また同時にNECAB2に匹敵しうる有望な食道癌転移関連分子を検索したところ、siRNAによる発現抑制が高度の細胞増殖抑制を引き起こす分子は同定されなかった。そのため、NECAB2についてさらに深く検討する方針とした。

食管癌转移途径特异性转录组分析显示，血行转移和淋巴转移之间存在表达模式明显不同的簇，并且我们仔细筛选了与血行转移和淋巴转移相关的分​​子。在本研究中，我们将通过分析与各类型食管癌转移相关的这些分子的功能和表达，阐明食管癌转移的分子生物学机制，并提前预测新的分子靶点治疗药物及其疗效。获取数据作为开发伴随诊断方法的基础。直到去年，我们一直在分析 NECAB2 作为我们的第一个候选分子，因为它是一种与血行转移相关的具有高度临床重要性的分子。去年，我们使用siRNA的敲低实验系统进行了功能分析，并使用多中心协作研究系统进行了表达分析。作为2020财年的主要结果，获得了以下数据。人工抑制 NECAB2 表达会增加 caspase3/7 活性并延长细胞周期 G0/G1 期。这些可以解释细胞增殖抑制活性的机制。使用表达载体强制表达 NECAB2 可增强癌细胞增殖。使用蛋白质印迹分析细胞内信号表明，抑制 NECAB2 会降低细胞周期调节剂细胞周期蛋白 D1 和 CDK2 的磷酸化。此外，我们发现 NECAB2 抑制降低了食管癌细胞粘附血管内皮的能力。这是阐明NECAB2特异性作用于血行转移的机制的重要数据。同时，我们寻找可与NECAB2相媲美的与食管癌转移相关的有前景的分子，并没有发现通过siRNA表达抑制导致细胞增殖高度抑制的分子。因此，我们决定更深入地考虑 NECAB2。

项目成果

転移臓器嗜好性に焦点をあてた食道癌バイオマーカー開発

食管癌生物标志物开发重点关注转移器官偏好

• 发表时间: 2022
• 作者: 神田光郎，清水 大，田中千恵，高見秀樹，猪川祥邦，服部憲史，林 真路，中山吾郎，藤原道隆，小寺泰弘