細胞接着因子を標的とするデュアル修飾型アンチセンス核酸を用いた革新的癌治療薬創出

使用靶向细胞粘附因子的双重修饰反义核酸创建创新癌症疗法

• 批准号: 21H02984
• 负责人: 小寺 泰弘
• 金额: $ 10.98万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02984/
• 关键词: 胃癌; アンチセンス核酸医薬; Transcriptome解析; コンパニオン診断; PCDHA11; 細胞接着因子

本研究では、細胞接着因子を標的としたアンチセンス核酸医薬による新たな胃癌分子標的治療薬およびコンパニオン診断技術開発を目指して実験を進めている。令和4年度は、以下の進捗を得ている。 メカニズム解明のために、ターゲットバリデーションを進めた。標的分子の機能解析としてアンチセンス核酸によるノックダウン前後でのスフェロイド形成能を比較したところ、ノックダウンにより顕著にスフェロイド形成は阻害された。また、幹細胞性のsurrogateマーカーであるALDH活性はノックダウンにより低下した。どのような細胞内シグナルに干渉することで活性を示しているかを調べるためにPTM Scanで得られたリン酸化状態のデータを解析して候補シグナル系を抽出した。標的分子の生態・恒常性維持における役割を調べるため、WT/ヘテロ/ホモノックアウトマウスを作成した。次年度に胎生死の有無、生態、成長、行動、代謝（血液検査を含む）および生殖を経時的に観察していく。in vitro活性評価も進め、癌種横断的（胃癌、大腸癌、肺癌、乳癌、食道癌、膵癌）な細胞株に対するアンチセンス核酸の細胞増殖阻害活性データを取得した。in vivo活性評価に先だって、in vitro細胞毒性評価とin vivo毒性評価（肝毒性に着目）を行い、配列選抜を進めた。コンパニオン診断開発に向けて、胃癌症例の組織検体を対象に免疫染色法を実施し、標的蛋白の組織中発現解析の条件設定を完了した。

在这项研究中，我们正在进行实验，目的是使用靶向细胞粘附因子的反义核酸药物开发新的靶向治疗药物，并使用反义核酸药物进行伴有诊断技术。在2022财年取得了以下进展。进行了目标验证以阐明该机制。当比较反义核酸敲低之前和之后的球体形成能力作为靶分子的功能分析时，敲低会显着抑制球体形成。此外，ALDH活性是一种干细胞替代标记，通过敲低降低。为了研究干扰细胞内信号的活性，分析了通过PTM扫描获得的磷酸化状态数据以提取候选信号系统。为了研究靶分子在维持生态学和体内平衡中的作用，创建了WT/Hetero/Homonoc-Out小鼠。第二年，我们将观察到存在或不存在活体生物和死亡，生态学，生长，行为，代谢（包括血液测试）和随着时间的流逝。还进行了体外活性评估，并获得了反义核酸针对跨型核酸癌细胞系（胃癌，结肠癌，肺癌，乳腺癌，食管癌，胰腺癌）的细胞增殖抑制活性的数据。在进行体内活性评估之前，进行了体外细胞毒性和体内毒性评估（以肝毒性为重点），并进行了序列选择。为了准备伴侣诊断的发展，对胃癌病例的组织标本进行了免疫染色，并设置了靶蛋白的组织表达分析的条件。