新規小腸栄養素センサー候補分子の機能解明

新型小肠营养传感器候选分子的功能阐明

基本信息

批准号：
18J00315
负责人：
戸田安香
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Meiji University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J00315/
关键词：
刷子細胞受容体消化管

项目摘要

１．培養細胞発現系を用いたオーファン受容体 Xの機能解析近年、刷子細胞にコハク酸受容体GPR91が発現し、原虫代謝物のコハク酸を受容することで原虫の排除応答が引き起こされることが明らかになった。一方、線虫に対する感染防御に寄与する受容体は同定されていない。当研究室では、これまでに刷子細胞の頂端部に局在して発現するGタンパク質共役型受容体として、オーファン受容体Xを発見している。そこで、受容体Xが腸管寄生線虫に対する感染防御機能を担うのではないかと考え、培養細胞発現系を用いて線虫抽出物の受容体X活性化能を調べた。また、化合物ライブラリー（合計13,000サンプル）を用いて、オーファン受容体Xのリガンド探索を行った。２．in vivo カルシウムイメージングを用いたオーファン受容体Xのリガンド探索刷子細胞特異的に赤色蛍光タンパク質tdTomatoを発現するトランスジェニックマウスの作出に成功した。また、このトランスジェニックマウスとカルシウムバイオセンサーYC3.60発現トランスジェニックマウスを交配することで、刷子細胞を特異的に蛍光標識したYC3.60マウスを作出することに成功した。更に、この2重トランスジェニックマウスを用いて、in vivo カルシウムイメージングを試みた。その結果、コハク酸やsalicin投与時に、刷子細胞（tdTomato陽性細胞）とその周囲において蛍光比の上昇が観察された。今後は、１，２より得られた成果をもとに、生体内における受容体Xの役割を明らかにしていきたい。

1.孤儿受体的功能分析就成了。另一方面，尚未确定有助于防止线虫感染的受体。我们的实验室之前发现了孤儿受体X，这是一种G蛋白偶联受体，位于刷状细胞的顶端区域并表达。因此，我们假设受体我们还使用化合物库（总共 13,000 个样本）对孤儿受体 X 进行配体搜索。 2.使用体内钙成像对孤儿受体 X 进行配体搜索我们成功创建了在刷状细胞中特异性表达红色荧光蛋白 tdTomato 的转基因小鼠。此外，通过将该转基因小鼠与表达钙生物传感器YC3.60的转基因小鼠杂交，我们成功地培育出了刷细胞被特异性荧光标记的YC3.60小鼠。此外，我们尝试使用这种双转基因小鼠进行体内钙成像。结果，在给予琥珀酸或水杨苷后，在刷状细胞（tdTomato阳性细胞）及其周围观察到荧光比率增加。今后，我们希望根据1和2获得的结果来阐明受体X在体内的作用。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Positive/Negative Allosteric Modulation Switching in an Umami Taste Receptor (T1R1/T1R3) by a Natural Flavor Compound, Methional.

DOI：
10.1038/s41598-018-30315-x
发表时间：
2018-08-07
期刊：
Scientific reports
影响因子：
4.6
作者：
Toda Y;Nakagita T;Hirokawa T;Yamashita Y;Nakajima A;Narukawa M;Ishimaru Y;Uchida R;Misaka T
通讯作者：
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发表时间：
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DOI：
发表时间：
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期刊：
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影响因子：
0
作者：
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通讯作者：
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发表时间：
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0
作者：
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DOI：
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期刊：
化学と生物
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0
作者：
戸田安香
通讯作者：
戸田安香

DOI：
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通讯作者：
瀧石朋大，佐古真，滝澤忍，Nadine ZUMBRAEGEL，Harald GROEGER，笹井宏明