化合物スクリーニングによる膀胱癌新規治療法の探索

通过化合物筛选探索膀胱癌治疗新方法

基本信息

批准号：
16J03059
负责人：
北悠希
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J03059/
关键词：
膀胱癌シスプラチン抗がん剤耐性

项目摘要

GC療法とDisulfiram(DSF)の併用による殺細胞効果増強のメカニズムが、銅トランスポーターであるATP7Aの細胞内局在の変化によってPtのDNA架橋量が増加し、活性酸素種の増大によってアポトーシスが誘導されることによるものであることを、in vitroの実験系で示した。併用療法の効果判定に用いる患者由来腫瘍皮下移植モデルを新たに3系統樹立した。膀胱癌細胞株同所移植マウスモデルおよび患者由来腫瘍片皮下移植モデルに対してGCとDSFの併用投与を行ったが、併用効果を確認できなかった。マウスモデルで併用効果が認められなかった原因が、DSFが血中および肝臓で速やかに代謝されてしまうことと考え、DSFをポリ乳酸でミセル化したナノ粒子製剤（DSF-NP）を作製した。UMUC3皮下移植マウスモデルにおいてシスプラチンとDSF-NPの併用効果を確認した。ヒト臨床検体での評価を行うために、Cancer Tissue-Originated Spheroid (CTOS)での薬剤感受性評価の系を構築した。患者由来腫瘍皮下移植モデル(2年間で6系統を樹立)のうちの1系統(PDX-7)から抽出したCTOSでシスプラチンとDSF-NPの併用効果を確認した。経尿道的膀胱腫瘍切除から得られたヒト膀胱癌組織由来のCTOSを複数株作製した。これを用いた併用療法の有効性を確認中であり、症例数が蓄積できたところで論文化の予定である。

体外实验系统表明，通过将GC疗法与二硫兰酯（DSF）结合起来增强细胞杀死作用的机制是由于铜转运蛋白ATP7A亚细胞定位的变化所致，这增加了PT中DNA交联的量，并通过增加反应氧气来诱导凋亡。已经建立了三个新的皮下患者衍生的肿瘤植入模型，以确定联合疗法的有效性。在膀胱癌细胞系的原位小鼠模型中，在患者衍生的肿瘤的皮下肿瘤碎片植入模型中，与GC和DSF结合使用GC和DSF，但没有确认组合的影响。在小鼠模型中缺乏合并用途的原因是，DSF在血液和肝脏中迅速代谢，我们制备了一种纳米颗粒制剂（DSF-NP），其中DSF用poly酸胶状酸粘合了。在UMUC3中植入的小鼠模型中证实了顺铂和DSF-NP的综合作用。构建了对癌症组织原始球体（CTO）的药物敏感性评估系统，以在人类临床标本中进行评估。从患者衍生的皮下肿瘤植入模型中提取的CTO证实了顺铂和DSF-NP的综合作用（在两年内建立了6条线）（PDX-7）。制备了源自从胸腔膀胱肿瘤切除的人膀胱癌组织的多种CTO菌株。目前正在确认使用这种方法的组合疗法的有效性，一旦累积了病例的数量，就计划了培养物。