冬虫夏草から抽出されるコルジセピンの多糖類とのシナジー効果による抗腫瘍性の促進

从冬虫夏草中提取的虫草素与多糖的协同作用促进抗肿瘤特性

基本信息

批准号：
09F09303
负责人：
櫻井明彦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
University of Fukui
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

冬虫夏草が生産するコルジセピンやそのアナログは、HIVなどの感染症や白血病などの治療薬として研究が進められているが、通常の通気攪拌培養などの液体培養法では生産性が低く、各種生理活性試験を行うことが難しい。そこで、大量生産が容易な液体培養法によるコルジセピン生産について培養条件を検討した。また、簡便な精製方法についても検討した。液体表面培養法では、培養液組成の最適化によりグルコース濃度、酵母エキス濃度ともに80g/Lを超える高濃度の設定となっている。このため、オートクレーブ滅菌に伴うメイラード反応により生成するメラノイジンの、コルジセピン生産に及ぼす影響が無視できないレベルに高くなってきた。そこで、培地全体のろ過滅菌や培地成分の個別滅菌などを検討したところ、個別滅菌では更なる高濃度の設定が必要になり、特にグルコースの場合に溶液粘度が非常に高くなること、酵母エキスの溶解度が限界付近に有ることから実用的ではないことが明らかとなった。そこで、ろ過滅菌について検討したところ、操作性に問題は無く、実際に培養すると従来のオートクレーブ滅菌の30%以上高いコルジセピン濃度と生産速度が得られることが分かった。さらに、ろ過滅菌した培養液では生産するコルジセピンが高濃度になるため、培養液中のコルジセピンが結晶として沈殿することが明らかとなった。この沈殿を回収し種々の条件を検討したところ、再結晶することにより簡便に純度95%以上のコルジセピンを得ることが可能となった。

冬虫夏草产生的虫草素及其类似物正在研究作为艾滋病毒和白血病等传染病的治疗剂，但传统的液体培养方法（例如通气搅拌培养）的生产率较低，并且难以进行各种生理活性测试。做。因此，我们使用有利于大规模生产的液体培养方法研究了虫草素生产的培养条件。我们还考虑了一种简单的纯化方法。在液体表面培养法中，通过优化培养基组成，将葡萄糖浓度和酵母提取物浓度均设定为超过80g/L的高浓度。为此，伴随高压灭菌的美拉德反应产生的类黑素对虫草素生产的影响已经达到了不可忽视的程度。因此，我们考虑了对整个培养基进行过滤灭菌和对个别培养基成分进行灭菌等方法，发现单独灭菌需要较高的浓度设置，并且溶液粘度会极高，尤其是葡萄糖，而酵母很明显，它不实用，因为溶解度接近极限。因此，我们研究了过滤灭菌，发现操作性没有问题，而且在实际培养时，可以获得比传统高压灭菌高30%的虫草素浓度和产率。此外，已经表明，在过滤灭菌的培养液中产生的虫草素具有高浓度，因此培养液中的虫草素以晶体形式沉淀。收集该沉淀物并研究各种条件后，通过重结晶可以容易地获得纯度为95％以上的虫草素。