ＥＳ細胞の浸透圧応答とＡＶＰニューロンへの再生・分化メカニズムの解明

阐明ES细胞的渗透反应以及再生和分化为AVP神经元的机制

基本信息

批准号：
15J40001
负责人：
佐藤(沼田) かお理
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Fukuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、細胞体・樹状突起、及び軸索終末からのAVP分泌に重要な役割を担っているCa2+チャネルについて実験を行った。アントラニル酸誘導体であるフルフェナム酸（FFA）は、ラット動脈平滑筋細胞のL型Ca2+チャネルを阻害することが以前に報告されている。そこで、ラット脳の視索前核から単離されたAVPニューロンにおける電位依存性Ca2+チャネルに対するFFAの効果を検討した。電圧固定パッチクランプ法で記録されたラットAVPニューロンのCa2+チャネル電流は、細胞外液を低浸透圧液から高浸透圧液に置き換えても、有意な変化は見られなかった。FFAを投与すると、Ca2+チャネル電流は有意に抑制された。Ca2+チャネル電流は、L型Ca2+チャネルブロッカー、ニフェジピン、及びP/Q型Ca2+チャネルブロッカー、ω-アガトキシンIVAの投与による影響は受けなかった。一方、N型Ca2+チャンネルブロッカー、ω-コノトキシンGVIA（ω-CgTX）またはT型Ca2+チャンネルブロッカー、NNC55-0396（NNC）を投与すると、Ca2+チャネル電流が有意に抑制された。ω-CgTXとNNCを同時に投与すると、Ca2+チャネル電流はほぼ完全に抑制された。 FFAは、ω-CgTX非感受性（T型）成分だけでなく、Ca2+チャネル電流のNNC非感受性（N型）成分も有意に阻害した。これらの結果より、N-およびT-型Ca2+チャネルがAVPニューロンの細胞体/樹状突起において機能的に発現しており、共にFFA感受性であることが明らかになった。RPDとして採用していただいていた期間中に行った、本年度の研究成果を含むラットAVPニューロンの高浸透圧条件下における浸透圧応答における研究成果は、現在、論文投稿準備の最終段階にある。RPD期間内での投稿という目標は残念ながら成し遂げることが出来なかったが、今年度中に投稿を予定している。

今年，我们对CA2+通道进行了一项实验，该实验在轴线结束的细胞，抒情投影和AVP分泌的分泌中发挥了重要作用。以前据报道它抑制大鼠动脉平滑肌细胞的L形Ca2+通道，即蒽烷基酸衍生物。因此，我们检查了从大鼠脑的视觉核中分离出的AVP神经元中Ca2+通道的FFA效应。电压固定贴片夹方法记录的大鼠AVP神经元的Ca2+通道电流，即使在高渗透压溶液中用高渗透压溶液代替细胞外流体，也没有任何显着变化。当施用FFA时，Ca2+通道电流会受到显着抑制。 CA2+通道电流不受L型Ca2+通道阻滞剂，Nipperpin和P/Q类型Ca2+通道阻滞剂和ω-agatoxin IVA的影响。另一方面，当N型Ca2+通道阻滞剂，ω-二毒素GVIA（ω-CGTX），T型Ca2+通道阻滞剂和NNC55-0396（NNC）时，CA2+通道电流受到了显着抑制。。当同时给予ω-CGTX和NNC时，几乎完全抑制了Ca2+通道电流。 FFA不仅被显着抑制了Ca2+通道电流的非敏感（t型）分量的ω-CGTX非敏感（t类型）分量。这些结果表明，N和T型Ca2+通道在AVP神经元的细胞/二元投影中均表达，两者均是FFA敏感性。该研究导致在大鼠AVP神经元的高渗透压条件下的渗透压反应，包括今年的研究结果，该研究结果被采用为RPD，目前正处于准备论文准备的最后阶段。不幸的是，无法完成在RPD期间内发布的目标，但原定于今年发布。