感染初期における細胞の抗ウイルス応答の選択

早期感染期间细胞抗病毒反应的选择

• 批准号: 15J12554
• 负责人: 井上 萌
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J12554/
• 关键词: I型IFN; アポトーシス; 自然免疫; ウイルス感染; I型インターフェロン; 抗ウイルス応答

これまでにRNAウイルス刺激の模倣刺激である二本鎖RNA刺激後24時間のマウス胎児期線維芽細胞(MEF)において、I型IFN産生細胞とアポトーシス細胞が異なる細胞集団であることを示してきた。さらに、これまでに1細胞から増殖させたクローン集団においてもI型IFN産生集団とアポトーシス集団という異なる2つの集団に分かれることを示してきた。このことからたとえ遺伝的に均一な細胞集団においてもI型IFN産生集団とアポトーシス集団という2つの集団に分かれることが示唆された。しかし、たとえ均一なクローン集団においても、一部の細胞でどちらかの応答を選びやすいといったバイアスがかかっていた可能性が考えられる。そこで、二本鎖RNA刺激後にI型IFNを産生した細胞をFACSで単離し、二度目の二本鎖RNA刺激を行った。すると二度目の二本鎖RNA刺激に対しても一度目の刺激と同様の割合でI型IFN産生細胞とアポトーシス細胞が現れた、さらに一度目にI型IFNの産生もアポトーシスも誘導しなかった細胞集団を単離して、二度目の二本鎖RNA刺激を行っても一度目と同様の割合でI型IFN産生集団とアポトーシス集団に分かれた。これらの結果から、どちらの応答を誘導するかはあらかじめ決まっているわけではなく、確率論的なプロセスが関与する可能性が考えられる。さらに実際のウイルス感染においてもI型IFN産生集団とアポトーシス集団に分かれるのかを調べた。MEFに対して水泡性口内炎ウイルスを感染させたところ、この場合もI型IFN産生集団とアポトーシス集団に分かれた。この結果から実際のウイルス感染においても2つの集団に分かれることが示された。今回用いたtiterでは、ウイルスのtiterが高いほどI型IFN産生集団の割合が高かった。この結果からウイルスのtiterが抗ウイルス応答の選択に影響を与える可能性が示唆された、

我们之前已经证明，在模拟 RNA 病毒刺激的双链 RNA 刺激后 24 小时，小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 中产生 I 型 IFN 的细胞和凋亡细胞是不同的细胞群。此外，我们还表明，从单个细胞生长的克隆群体可以分为两个不同的群体：产生 I 型 IFN 的群体和凋亡群体。这表明即使是遗传同质的细胞群也可以分为两个群：产生 I 型 IFN 的群和凋亡群。然而，即使在同质克隆群体中，也可能存在一些细胞倾向于选择一种反应或另一种反应的偏差。因此，通过FACS分离双链RNA刺激后产生I型IFN的细胞，并进行第二次双链RNA刺激。当用双链RNA第二次刺激时，以与第一次刺激相同的比例出现I型IFN产生细胞和凋亡细胞，并且即使在第一次刺激后，也没有诱导I型IFN产生或凋亡。第二次分离群体并用双链RNA刺激，将其分为I型IFN产生群体和凋亡群体，比例与第一次相同。这些结果表明，诱发哪种反应并不是预先确定的，并且可能涉及随机过程。此外，我们还研究了在实际病毒感染中是否可以将I型IFN产生群体和凋亡群体分开。当MEF感染水泡性口炎病毒时，它们再次分为产生I型IFN的群体和凋亡群体。这些结果表明，实际的病毒感染可以分为两类。以此次使用的滴度来看，病毒滴度越高，产生I型干扰素的群体比例就越高。这一结果表明病毒滴度可能影响抗病毒反应的选择。

项目成果

The stochastic nature of cellular choice for inducing type I interferon or apoptosis in the early stage of viral infection

病毒感染早期诱导I型干扰素或细胞凋亡的细胞选择的随机性

• 发表时间: 2015
• 作者: 井上 萌