感染初期における細胞の抗ウイルス応答の選択

早期感染期间细胞抗病毒反应的选择

• 批准号: 15J12554
• 负责人: 井上 萌
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J12554/
• 关键词: I型IFN; アポトーシス; 自然免疫; ウイルス感染; I型インターフェロン; 抗ウイルス応答

これまでにRNAウイルス刺激の模倣刺激である二本鎖RNA刺激後24時間のマウス胎児期線維芽細胞(MEF)において、I型IFN産生細胞とアポトーシス細胞が異なる細胞集団であることを示してきた。さらに、これまでに1細胞から増殖させたクローン集団においてもI型IFN産生集団とアポトーシス集団という異なる2つの集団に分かれることを示してきた。このことからたとえ遺伝的に均一な細胞集団においてもI型IFN産生集団とアポトーシス集団という2つの集団に分かれることが示唆された。しかし、たとえ均一なクローン集団においても、一部の細胞でどちらかの応答を選びやすいといったバイアスがかかっていた可能性が考えられる。そこで、二本鎖RNA刺激後にI型IFNを産生した細胞をFACSで単離し、二度目の二本鎖RNA刺激を行った。すると二度目の二本鎖RNA刺激に対しても一度目の刺激と同様の割合でI型IFN産生細胞とアポトーシス細胞が現れた、さらに一度目にI型IFNの産生もアポトーシスも誘導しなかった細胞集団を単離して、二度目の二本鎖RNA刺激を行っても一度目と同様の割合でI型IFN産生集団とアポトーシス集団に分かれた。これらの結果から、どちらの応答を誘導するかはあらかじめ決まっているわけではなく、確率論的なプロセスが関与する可能性が考えられる。さらに実際のウイルス感染においてもI型IFN産生集団とアポトーシス集団に分かれるのかを調べた。MEFに対して水泡性口内炎ウイルスを感染させたところ、この場合もI型IFN産生集団とアポトーシス集団に分かれた。この結果から実際のウイルス感染においても2つの集団に分かれることが示された。今回用いたtiterでは、ウイルスのtiterが高いほどI型IFN産生集団の割合が高かった。この結果からウイルスのtiterが抗ウイルス応答の選択に影響を与える可能性が示唆された、

迄今为止，已经表明，在双链RNA刺激后24小时，在小鼠胎儿成纤维细胞（MEFS）中，产生I型IFN的细胞和凋亡细胞是不同的细胞群，这是一种模仿RNA病毒刺激。此外，已经表明，从一个细胞中生长的克隆人群也分为两个不同的人群：I型IFN产生人群和凋亡人群。这表明即使是遗传均匀的细胞种群也可以分为两组：I型IFN产生人群和凋亡人群。但是，即使在统一的克隆人群中，有些细胞也会受到偏见，以使选择任何一种响应变得更容易。因此，通过FACS分离出产生I型IFN的细胞，并第二次刺激双链RNA。然后，产生I型IFN的细胞和凋亡细胞的出现与第一个刺激的速率相同，并且不会孤立的IFN IFN产生或凋亡的细胞群体，即使在第二个双链RNA刺激后，这些细胞也与第I型IFN产生和凋亡组相同的速度分离为第一个刺激速率。这些结果表明，没有预先确定要诱导的响应，并且可能涉及随机过程。此外，我们研究了实际的病毒感染是否可以分为I型IFN产生人群和凋亡人群。当MEF感染了囊泡气孔病毒时，它们还分为I型IFN产生人群和凋亡人群。这些结果表明，即使实际的病毒感染也可以分为两组。在这段时间里，病毒滴度越高，产生I型人群的比例越高。该结果表明，病毒滴度可能会影响抗病毒反应的选择。

项目成果

The stochastic nature of cellular choice for inducing type I interferon or apoptosis in the early stage of viral infection

病毒感染早期诱导I型干扰素或细胞凋亡的细胞选择的随机性

• 发表时间: 2015
• 作者: 井上 萌