腎及び肝薬物トランスポータの発現制御機構の解明と個別化薬物療法への応用

肾脏和肝脏药物转运蛋白表达控制机制的阐明及其在个体化药物治疗中的应用

基本信息

批准号：
08J02202
负责人：
小笠原健
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

薬物トランスポータは薬物代謝酵素と共に様々な薬物の体内動態を制御している。近年、薬物トランスポータの発現量の個体差が、薬物の体内動態の個体差に関わっていることが明らかにされてきた。本研究では、薬物トランスポータの発現に影響を及ぼす因子を明らかにすることを目的として、肝有機アニオントランスポータ遺伝子のプロモーター領域の一塩基多型(regulatory SNP : rSNP)について検討を加えた。さらに、重回帰分析を用いて肝薬物トランスポータの発現に影響を及ぼす因子の探索を行った。肝がん患者の非腫瘍部より抽出したゲノムDNAを用いて、MRP2、OATP1B1、OATP1B3及びOATP2B1遺伝子のプロモーター領域(約1kb)のダイレクトシークエンスを行った。MRP2、OATP1B1、OATP1B3で同定されたrSNPはトランスポータのmRNA発現量に影響を及ぼさなかった。一方、OATP2B1で同定された7つのrSNPのうち、-282G>AはOATP2B1 mRNA発現量を有意に増加させた。従って、OATP2B1の-282G>Aは、OATP2B1発現の個体差を規定する要因の一つとなることが示された。年齢や性別、病態などの様々な要因の中から、肝薬物トランスポータの発現に影響を及ぼす因子を抽出することを目的として、重回帰分析を行った。17種の肝薬物トランスポータの中、最も予測精度の高かったMRP4に注目したところ、C型肝硬変でMRP4の発現量が上昇することがわかった。さらに、C型肝硬変では他の肝薬物トランスポータの発現も変動し、MRP4を含む一部の薬物トランスポータの発現は上昇したが、多くの薬物トランスポータの発現は減少することが明らかとなった。以上、重回帰分析によって、肝薬物トランスポータの発現に影響を及ぼす重要な因子としてC型肝硬変を同定することができた。

药物转运蛋白与药物代谢酶一起控制各种药物的药代动力学。近年来，研究发现药物转运蛋白表达水平的个体差异与药物药代动力学的个体差异有关。在本研究中，我们研究了肝脏有机阴离子转运蛋白基因启动子区域的单核苷酸多态性（调节性SNP：rSNP），旨在阐明影响药物转运蛋白表达的因素。此外，使用多元回归分析来寻找影响肝脏药物转运蛋白表达的因素。使用从肝癌患者非肿瘤区域提取的基因组 DNA 对 MRP2、OATP1B1、OATP1B3 和 OATP2B1 基因的启动子区域（约 1 kb）进行直接测序。 MRP2、OATP1B1 和 OATP1B3 中鉴定的 rSNP 不影响转运蛋白 mRNA 表达水平。另一方面，在OATP2B1中鉴定的7个rSNP中，-282G>A显着增加了OATP2B1 mRNA的表达水平。因此，OATP2B1的-282G>A被证明是调节OATP2B1表达个体差异的因素之一。进行多元回归分析，目的是从年龄、性别和疾病状态等多种因素中提取影响肝脏药物转运蛋白表达的因素。在17种肝脏药物转运蛋白中，我们重点关注预测准确率最高的MRP4，发现C型肝硬化中MRP4的表达水平升高。此外，C型肝硬化中其他肝脏药物转运蛋白的表达也发生改变，包括MRP4在内的一些药物转运蛋白的表达增加，但许多药物转运蛋白的表达减少。如上所述，通过多元回归分析，我们能够确定C型肝硬化是影响肝脏药物转运蛋白表达的重要因素。