高内皮細静脈の可塑的な形質変化におけるヘパラン硫酸の機能解明

阐明硫酸乙酰肝素在高内皮微静脉塑性变化中的功能

• 批准号: 14J07438
• 负责人: 坪井 康一郎
• 金额: $ 1.39万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J07438/
• 关键词: 糖鎖; 高内皮細静脈; 血管内皮; HEV

免疫誘導時における高内皮細静脈の可塑的な形質変化とその機能を明らかにするため、ハプテン誘導性接触性皮膚炎を実施し、リンパ節凍結切片を作製し、数種類の抗糖鎖抗体で染色した。その結果、免疫応答後、経時的に 6-sulfo sialyl Lewis X糖鎖構造が減少し、MAdCAM－1 が高内皮細静脈上に発現することを確かめた。さらに、ある糖鎖構造が高内皮細静脈でない血管内皮において恒常的に発現することを見出した。リンパ節内において、高内皮細静脈でない血管内皮で当該糖鎖構造が恒常的に発現する知見を元に、血管内皮細胞が豊富な肺に着目した。 肺組織消化物を抗糖鎖抗体で染色しFACS解析を行った。その結果、当該糖鎖が一般的な血管内皮である肺血管内皮細胞にも発現することを見出した。注目した糖鎖構造が血管内皮細胞において発現することはこれまでに報告がなく、この点において新たな知見を得たと考え、血管内皮における当該糖鎖の発現についてさらに解析を進めた。上記の研究で使用したマウス系統(C57BL/6)以外のマウス系統(Balb/c)でも上記と同様な実験を行ったところ、同様な結果が得られた。従って、マウス系統によらず血管内皮において当該糖鎖構造が発現することが示唆されたさらに、当該糖鎖構造の生合成に関わると考えられる幾つかの糖転移酵素欠損マウスを用意し、肺血管内皮の FACS 解析を行うことで、当該糖鎖構造の生合成に関わる酵素を推定した。また、セルソーターを用いて当該糖鎖を発現する血管内皮を高純度で精製可能な実験系を樹立した。今後、当該糖鎖構造の生合成酵素欠損マウスや当該糖鎖構造に対する抗体を活用することによって、血管内皮における当該糖鎖構造の機能を明らかにし、創薬に繋がる知見が得られると考えられる。

为了阐明免疫诱导过程中高内皮小静脉的塑性变化及其功能，我们进行了半抗原诱导的接触性皮炎，制备了冷冻淋巴结切片，并用几种类型的抗聚糖抗体对其进行了染色。结果，我们确认了 6-磺基唾液酸路易斯此外，我们发现某种糖链结构在除高内皮微静脉之外的血管内皮中组成型表达。基于这种糖链结构在血管内皮中不断表达，但不在高内皮小静脉和淋巴结中表达的知识，我们将重点放在富含血管内皮细胞的肺部。 用抗聚糖抗体对消化的肺组织进行染色并进行FACS分析。结果，他们发现糖链也在肺血管内皮细胞（常见的血管内皮细胞）中表达。之前没有报道过我们感兴趣的糖链结构在血管内皮细胞中表达，我们相信我们已经获得了这方面的新知识，并继续对血管内皮细胞中糖链的表达进行进一步分析。当使用上述研究中使用的小鼠品系(C57BL/6)以外的小鼠品系(Balb/c)进行与上述类似的实验时，获得了类似的结果。因此，表明无论小鼠品系如何，相关糖链结构都在血管内皮中表达。此外，我们制备了几种被认为参与相关糖链结构生物合成的糖基转移酶缺陷小鼠。通过对内皮进行 FACS 分析，我们估计了参与糖链结构生物合成的酶。此外，我们建立了一个实验系统，可以使用细胞分选仪纯化血管内皮，以高纯度表达糖链。将来，通过利用糖链结构生物合成酶缺陷的小鼠和针对糖链结构的抗体，人们认为糖链结构在血管内皮中的功能将被阐明，并且将导致药物发现的知识将获得。

项目成果

オートファジー関連遺伝子Atg7は腸内細菌叢を制御し大腸炎を抑制する

自噬相关基因 Atg7 控制肠道菌群并抑制结肠炎

• 发表时间: 2015
• 作者: 坪井康一郎;西谷麻予;今井康之;小松雅明;川島博人
• 通讯作者: 川島博人