多光子励起顕微鏡によるヒト皮膚ライブイメージング法、低侵襲診断法の開発

利用多光子激发显微镜开发人体皮肤实时成像方法和微创诊断方法

基本信息

批准号：
14J05153
负责人：
村田光麻
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

以下の2つの計画にもとづき、研究を進めた。(1)多光子顕微鏡を用いた、全身性強皮症の皮膚線維化の低侵襲診断技術とその定量評価系の確立前年度に確立した解析方法に基づいて、乳房外パジェット病の皮疹の三次元的形態の可視化を進めた。前年度の間に、乳房外パジェットの皮膚病変を立体的に解析することで、これまで不可能であった、病変の辺縁の詳細かつ広範な部分に亘る形態を観察できるようになっていたが、さらに検体数を増やし、一般的な腫瘍辺縁の形態の理解を進めた。その結果、全ての症例において病変の辺縁がこれまで予想されてきたよりも整っていることを見出した。一部の症例では辺縁から離れて小さな病巣が存在するという、特異な進展様式が示唆された。さらに、臨床的に観察不可能な病変の境界線を可視化し、その境界線が、観察しえた限り、他の病変と同様の形態をしていることを見出した。以上の内容を投稿準備中であり、次年度に投稿予定である。次年度の間には、これらの特殊な病変と通常の病変とを区別できるマーカーの検索を行う予定である。具体的には、細胞の遊走に関わる分子について、網羅的に免疫染色を行うことを検討している。仮にこれらの細胞に特異的に発現する分子が同定された場合、臨床的に、通常の病変よりも注意深く扱うべき病変の同定などに応用できる可能性がある。本来の研究予定であった強皮症については、疾患モデルであるブレオマイシン誘発強皮症マウスモデルを作成し、前年度に確立した観察技術を用いて観察を行った。次年度に解析を行う予定である。(2)ヒト皮膚組織の細胞動態ライブイメージング基盤技術の確立前年度に5-aminolevurinic acidを用いた腫瘍細胞の可視化方法について検討したが、今年度は(1)を主に進めたため、(2)については進展がない。

该研究是基于以下两个计划进行的。 (1)建立系统性硬化症皮肤纤维化的多光子显微镜微创诊断技术及其定量评价系统。在前一年建立的分析方法的基础上，我们推进了原始形态的可视化。去年，通过对乳房外佩吉特皮肤病变进行三维分析，可以详细、大范围地观察病变边缘的形态，这在以前是不可能的，但他们进一步增加了标本数量，并进一步推进了研究。他们对肿瘤边缘常见形态的理解。结果，他们发现所有病例的病变边缘比之前预期的更加规则。在某些情况下，小病变远离边缘，表明有独特的进展模式。此外，他们将临床上无法观察到的病变的边界可视化，发现这些边界在可观察到的范围内与其他病变具有相似的形态。以上内容目前正在准备提交中，预计明年提交。明年，我们计划寻找能够区分这些特殊病变和正常病变的标记物。具体来说，我们正在考虑对参与细胞迁移的分子进行全面的免疫染色。如果鉴定出这些细胞中特异性表达的分子，则可能在临床上适用于鉴定应比正常病变更仔细治疗的病变。关于硬皮病，这是最初的研究计划，我们创建了一种疾病模型，即博莱霉素诱导的硬皮病小鼠模型，并使用前一年建立的观察技术对其进行了观察。我们计划明年进行分析。（2）建立人体皮肤组织细胞动态实时成像的基础技术虽然去年我们研究了使用5-氨基乙酰尿酸可视化肿瘤细胞的方法，但今年我们主要关注（1），所以（2）此事尚未取得任何进展。