青枯病菌と繊維状ファージの相互作用機構解析：バイオコントロールへの利用

青枯病菌与丝状噬菌体相互作用机制分析：在生物防治中的应用

基本信息

批准号：
14F03086
负责人：
山田隆
金额：
$ 0.38万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14F03086/
关键词：
青枯病菌バクテリオファージ phiRSM バイオコントロールワクチン

项目摘要

（１）繊維状ファージφRSM感染によって引き起こされる宿主菌病原性喪失の分子基盤の確立:φRSM感染により宿主細胞表面が変化し、ファージタンパク質の蓄積とファージ粒子の形成・放出が起こる。その結果、クオーラム感知活性の低下を招きバイオフィルム形成能減少、病原性の発現の抑制が起こる事が示された。また、φRSMのゲノムにコードされたリプレッサー遺伝子ORF15によって、宿主病原性制御遺伝子(phcA)が発現抑制されることを確認した(論文発表)。（２）新規小型セリンレコンビナーゼによる繊維状ファージφRSMの宿主ゲノム組み込み機構の解明: φRSM1がコードする新規小型セリンレコンビナーゼ遺伝子ORF14がファージの宿主ゲノムへの組み込み（プロファージ化）に働く事をin vivo系で証明した。このφRSM1-ORF14の発現ベクターへのクローニングに成功し、in vitroでの反応系において、組換え基質DNA配列、必須ヌクレオチド部位、酵素ヌクレオチド相互作用の詳細な解析を行った。（３）φRSM感染菌がもたらす植物病害抵抗性増強効果（ワクチン効果）の分子基盤確立:φRSM感染によって非病原化した細菌の接種により、植物の防御遺伝子発現を誘導できることを示した。（４）φRSM感染菌／青枯病ワクチンを例としての植物病コントロール用ファージワクチンの検討・探索:より多種の青枯病菌に対応するコントロール技術を開発するためには、宿主域の広いファージを取得する必要がある。新たに青枯病菌に感染する新規ファージを単離した。

（1）由感染引起的分子感染的柔性露天φRSM：φRSM感染改变了宿主细胞表面，phaginopquite的积累以及噬菌体颗粒的形成和释放。结果，结果表明，群体传感活性的降低，生物膜形成减少并抑制致病表达。此外，还抑制了φRSM基因组中编码的阻遏物基因ORF15在抑制宿主病原体（PHCA）（PHCA）（论文公告）的表达时被抑制（PHCA）。（2）新的小Cerin重组酶的纤维形噬菌体φRSMφRSMHOUSE基因组组织元素机制：由φRSM1编码的新的小Cerin重组酶基因ORF14是在phage的宿主基因组中掺入（专业）。系统。该φRSM1-ORF14表达载体的克隆成功，在体外反应系统中，我们对重组DNA序列，必需核苷酸位点，酶核苷酸相互作用进行了详细分析。（3）建立的分子感染增强作用（疫苗效应）（疫苗效应）（疫苗作用）（疫苗效应）：已酶的细菌接种φRSM可以表明可以诱导种植的表达。（4）检查和寻找使用φRSM感染细菌 /蓝色dead疫苗的植物性控制的植物性控制，例如：为了开发与多种蓝色dead细菌相对应的控制技术，宿主中的大噬菌体区域。已经分离出一种新细菌感染的新噬菌体。