アルドステロン作用におけるミネラルコルチコイド受容体のSUMO化修飾の役割

盐皮质激素受体的SUMO化修饰在醛固酮作用中的作用

基本信息

批准号：
18790640
负责人：
横田健一
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790640/
关键词：
ミネラルコルチコイド MR SUMO1 アルドステロン転写

项目摘要

これまで多くの臨床研究や基礎研究によって、生体内でアルドステロンは炎症を惹起し、心臓や腎臓、血管といった臓器に肥大線維化を引き起こすことが知られているが、その詳細なメカニズムについてはまだ不明な点も多い。特に、生体内で血清アルドステロンが必ずしも高値でない場合であっても、MRを介した臓器障害が引き起こされる事実から、アルドステロン非依存性にMRが活性化される未知のメカニズムの存在が示唆されていた。一方で多くの蛋白質はリン酸化やユビキチン化などの多彩な翻訳後修飾を受け、蛋白質の機能が調節されていることが明らかとなってきている。そこで今回我々は蛋白質の翻訳語修飾のひとつであるSUMO化修飾に注目し、MRがSUMO化修飾の基質であるか検討し、その場合に転写調節における役割について解析を行なった。まずsite-directed mutagenesisを用いた変異MRの検討から、MRの中で89番目、399番目、494番目、953番目の計4ケ所のリジン残基がMR修飾を受ける部位であることが明らかとなった。そして、この変異MRを用いたルシフェラーゼアッセイや脱SUMO化酵素SENPlを用いてMRの脱SUMO化を誘導したときの転写活性の検討から、MRに脱SUMO化がおきることで、MR転写が活性化させるというメカニズムを明らかにした。

大量临床和基础研究表明，醛固酮会诱发体内炎症，导致心脏、肾脏、血管等器官肥厚性纤维化，但详细机制仍不清楚。特别是，即使体内血清醛固酮水平不一定高，也会引起 MR 介导的器官损伤，这一事实表明存在一种未知的机制，通过该机制，MR 以不依赖醛固酮的方式被激活。另一方面，我们已经清楚许多蛋白质会经历各种翻译后修饰，例如磷酸化和泛素化，从而调节其功能。因此，我们重点关注蛋白质翻译修饰之一的SUMO化，研究MR是否是SUMO化的底物，并分析其在转录调控中的作用。首先，使用定点诱变对突变体MR进行检查，结果显示总共有4个赖氨酸残基，即第89位、第399位、第494位和第953位，是经历MR Ta的位点。通过使用该突变体MR的荧光素酶测定以及使用去SUMO化酶SENP1诱导MR去SUMO化时的转录活性的研究，我们发现当MR中发生去SUMO化时MR转录被激活，这背后的机制被阐明。