ゼノフリーiPS細胞由来幹細胞の三次元細胞構造体が拓く骨再生医療

骨再生医学由源自无异种 iPS 细胞的干细胞衍生的三维细胞结构开创

• 批准号: 20K10003
• 负责人: 橋本 典也
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K10003/
• 关键词: iPS細胞

申請者はすでに、人工多能性幹細胞(iPS細胞)からMSC様細胞(iPSMSLC)を作製し、さらにiPSMSLCを骨芽細胞様細胞へと分化させることに成功した。すなわち、大型の骨再建に必須となる、大量の骨芽細胞を理論上無限の細胞供給源になりうるiPS細胞から作製し、さらに局所定着細胞数の向上には移植細胞の生存を向上させる新規の移植担体であるヒトI型コラーゲン様リコンビナントペプチドを用いることにより、これまでの細胞移植の問題点を解決し、大型の骨再生を誘導する方法を見出すことを本研究課題の目的とした。iPS細胞の培養、維持にはフィーダーレス・シングルセル継代を用い、無血清・ゼノフリー環境で行う。多分化能の確認にはFACS、免疫染色、qPCRによる未分化マーカーの発現解析を用いる。すでにFACSによって未分化マーカーが維持できていることを明らかにした。iPS細胞培養には、mTeSR1に変更し維持培養を行っている。また、ゼノフリーでiPSMSLCに分化させるためSTEMdiff Mesenchymal Progenitor Kitを用いて行った。iPS細胞から歯根膜幹細胞への分化誘導を行い、iPS細胞からCD29, CD44, CD90, CD105(+) CD14, CD19, CD34, CD45, TRA-1-60, TRA-1-80, SSEA4(-) の細胞表面マーカー発現を示し、Periostin, COL1A1, DLX5, CEMP1の遺伝子発現陽性、骨芽細胞分化培地での培養によって石灰化結節を形成する歯根膜幹細胞様の細胞集団への分化誘導に成功した。

申请人已经从诱导的多能干细胞（IPSMSLC）中产生了MSC样细胞（IPSMSLC），并成功地将IPSMSLC区分化为成骨细胞样细胞。 In other words, the purpose of this research topic was to create large amounts of osteoblasts, which are essential for large bone reconstruction, from iPS cells, which can theoretically become an infinite source of cell supply, and to further improve the number of locally-determined cells, using human type I collagen-like recombinant peptides, a novel transplant carrier that improves the survival of transplanted cells, to solve the problems of cell移植并找到一种诱导大骨再生的方法。使用无馈电，单细胞通道培养和维护IPS细胞，并在无血清，无XENO的环境中进行。 FACS，免疫染色和QPCR对未分化标记的表达分析用于确认多重电位。据透露，FACS已经维护了未分化的标记。 IPS细胞培养被更改为MTESR1并维持培养。此外，使用无Xeno-Fime使用STEMDIFF间充质祖细胞试剂盒分化为IPSMSLC。从IPS细胞诱导分化为牙周韧带干细胞，IPS细胞的细胞表面标记表达显示了CD29，CD44，CD90，CD90，CD90，CD14，CD19，CD19，CD19，CD34，CD45，CD45，CD45，Tra-1-60，Tra-1-60，Tra-1-80，tra-1-80和SseA4（ - ssea4（-ssea4）的频率众多案例，LIDISITION prections strike Indiation strike Indiation strike Indiation strike Incorthint actection-nesigniation sy pretinction strike Incortint在成骨细胞分化培养基中培养时，形成了钙化结节。

项目成果

Assessment of the Osteogenic Potential of Rat-derived Adipose Mesenchymal Stem Cells under Xeno-free conditions

无异源条件下大鼠脂肪间充质干细胞的成骨潜力评估

• 发表时间: 2022
• 作者: 孫 雨竹;城 潤一郎;橋本典也
• 通讯作者: 橋本典也

Bone Regeneration by Dedifferentiated Fat Cells Using Composite Sponge of Alfa-Tricalcium Phosphate and Gelatin in a Rat Calvarial Defect Model

在大鼠颅骨缺损模型中使用α-磷酸三钙和明胶复合海绵进行去分化脂肪细胞的骨再生

• DOI: 10.3390/app112411941
• 发表时间: 2021
• 期刊: Applied Sciences
• 作者: Tsumano Nobuhito;Kubo Hirohito;Imataki Rie;Honda Yoshitomo;Hashimoto Yoshiya;Nakajima Masahiro
• 通讯作者: Nakajima Masahiro

iPS細胞由来間葉系幹細胞を用いた広域顎骨組織欠損再生

使用 iPS 细胞衍生的间充质干细胞进行广泛的颌骨组织缺损再生

• 发表时间: 2022
• 期刊: 歯界展望
• 作者: 松本 直行;中山 亮子;山崎 智恵;井上 裕子;斎藤 一郎;沼本真一郎，横山敦郎，吉田靖弘;橋本典也
• 通讯作者: 橋本典也