IL-18により誘導される血清中の転移抑制因子の解析

IL-18诱导血清中转移抑制因子分析

基本信息

批准号：
18790285
负责人：
山田直子
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Hyogo College of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790285/
关键词：
インターロイキン18 転移骨肉腫骨肉種

项目摘要

IL-18が、NKおよびT細胞の殺細胞活性を増強することにより抗腫瘍効果を示すことは、我々の研究を含めた多くの研究により明らかにされている。我々は、NKおよびT細胞を欠く状態のマウスに、高肺転移株のマウス骨肉腫細胞(LM8細胞)を尾静脈から移植し肺転移を起こさせる系を用いて、IL-18の肺転移抑制に及ぼす効果を調べた。この実験によりIL-18は、抗腫瘍効果とは無関係にLM8細胞の肺転移を抑制する事および、IL-18の肺転移抑制作用は、LM8細胞に対するIL-18の直接作用ではなく、宿主細胞へのIL-18の作用を介する作用である事が明らかとした。さらに、細胞遊走能を調べる傷つけアッセイ法を用いて、IL-18投与マウスの血清が、LM8細胞や他の転移能をもつ腫瘍細胞(Lewis lung carcinoma、 B16melanoma)の遊走を抑制する事を報告した(Nakamura et al. 2006, J Cancer Immunol Immunother)。このIL-18投与マウスの血清中に存在する腫瘍細胞遊走抑制因子を同定する事が、本研究の目的である。これまでにELISA及びBio-Plex法を用いた解析の結果、いくつかのサイトカインの可能性が否定された。そこで本年度は限外濾過フィルターと液体クロマトグラフィーによる血清画分を用いた解析を行った。限外濾過フィルターを用いた場合では、分子量5万から10万の分画に細胞遊走抑制活性が存在した。液体クロマトグラフィーのイオン交換カラムとゲル濾過カラムを組み合わせると、分子量3万から5万にわずかなピークを検出した、このピークを示すタンパク質に細胞遊走抑制活性があるか検討中である。

包括我们在内的许多研究表明，IL-18 通过增强 NK 和 T 细胞的杀细胞活性来发挥抗肿瘤作用。我们使用一种系统，将肺部高度转移的鼠骨肉瘤细胞（LM8细胞）通过尾静脉移植到缺乏NK和T细胞的小鼠体内，以引起肺部转移。该实验表明，IL-18抑制LM8细胞的肺转移与其抗肿瘤作用无关，并且IL-18对肺转移的抑制作用不是由于IL-18对LM8细胞的直接作用，而是由于其对宿主的作用。结果表明，该作用是由 IL-18 对细胞的作用介导的。此外，他们使用损伤试验来检查细胞迁移能力，报告说，用 IL-18 治疗的小鼠血清抑制了 LM8 细胞和其他具有转移潜力的肿瘤细胞（刘易斯肺癌、B16 黑色素瘤）的迁移（Nakamura 等人，2017）。 2006 年，《癌症免疫学杂志》。本研究的目的是鉴定用 IL-18 治疗的小鼠血清中存在的肿瘤细胞迁移抑制因子。通过ELISA和Bio-Plex方法分析，排除了某些细胞因子的可能性。因此，今年我们使用超滤过滤器和液相色谱法对血清组分进行了分析。当使用超滤过滤器时，在50,000至100,000的分子量级分中存在细胞迁移抑制活性。当液相色谱离子交换柱和凝胶过滤柱组合时，在30,000至50,000的分子量范围内检测到轻微的峰。我们目前正在研究表现出该峰的蛋白质是否具有细胞迁移抑制活性。