細胞内Ｃａシグナルのスイッチとなる新発見のコネキシンの生理機能と発現制御機構

新发现的切换细胞内Ca信号的连接蛋白的生理功能和表达控制机制

基本信息

批准号：
12F02392
负责人：
中村信大
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

私たちは、ゼブラフィッシュおいてコネキシン36.7(Cx36.7)の機能不全が心筋の筋原繊維の配向の乱れを引き起こし、心臓形成と機能不全に至る事を明らかにしてきた。本研究では、コネキシン36.7(Cx36.7)の心筋前駆細胞特異的な発現の調節機構について明らかにする解析を行った。心筋細胞の分化誘導に関与する転写因子の発現パターンについて，心臓形成時のゼブラフィッシュ稚魚を用いてin situ hybridization法により調べ，Cx36.7の発現パターンを比較したところ，発現のタイミングと局在いずれにおいてGata4がCx36.7と一致することが分かった。そこで，Gata4の発現をアンチセンスモルフォリノにより特異的に抑制したところ，Cx36.7遺伝子のプロモーター活性が著しく下がることが分かった。同様な結果は，プロモーター内部のGata型転写因子の結合配列に変異を導入しても認められた。この結合配列がGata4との相互作用部位であることをin vitroのゲルシフト解析で確認した。以上の結果から，Cx36.7遺伝子の心筋細胞特異的な発現はGata4による転写制御によるところが大きいことが分かった。また、Cx36.7の下流のシグナル伝達について解析を行い、候補転写因子を一つ同定することが出きた。現在、この分子の機能解析を行っている。

我们已经证明，在斑马鱼中，连接蛋白 36.7 (Cx36.7) 功能障碍会导致心肌中肌原纤维的方向紊乱，从而导致心脏形成和功能障碍。在本研究中，我们进行了分析以阐明连接蛋白36.7（Cx36.7）的心脏祖细胞特异性表达的调节机制。利用幼年斑马鱼心脏形成过程中参与心肌细胞分化诱导的转录因子的表达模式进行了研究，并比较了Cx36.7的表达模式，发现Gata4与Cx36.7一致。因此，当我们使用反义吗啉特异性抑制Gata4表达时，我们发现Cx36.7基因的启动子活性显着降低。当将突变引入启动子内的 Gata 型转录因子的结合序列时，观察到类似的结果。体外凝胶位移分析证实该结合序列是与Gata4的相互作用位点。这些结果表明，Cx36.7 基因的心肌细胞特异性表达很大程度上是由于 Gata4 的转录控制。我们还分析了 Cx36.7 下游的信号转导，并能够鉴定出一种候选转录因子。我们目前正在对该分子进行功能分析。

项目成果

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专利数量（0）

Congenital heart disease and biotechnology: Connecting by connexin.

先天性心脏病和生物技术：通过连接蛋白进行连接。

DOI：
10.4028/www.scientific.net/amr.995.85
发表时间：
2014
期刊：
Adv. Mater. Res.
影响因子：
0
作者：
Sultana N;Nakamura N;Hirose S;Kutsuzawa K;Akaike T;Nag K.
通讯作者：
Nag K.

Early cardiac connexin acts as a Ca2+ hemichannel that regulates heart morphogenesis via NFATc4 activation

早期心脏连接蛋白充当 Ca2 半通道，通过 NFATc4 激活调节心脏形态发生

DOI：
发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
0
作者：
Naznin Sultana;Kakon Nag;Akira Kato;Atsushi Kawakami;Koichi Kutsuzawa;Toshihiro Akaike;Shigehisa Hirose and Nobuhiro Nakamura
通讯作者：
Shigehisa Hirose and Nobuhiro Nakamura

The expression of zebrafish cx36.7 gene is regulated by GATA4 in early heart development

斑马鱼cx36.7基因在早期心脏发育中的表达受GATA4调控

DOI：
发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
0
作者：
Hisako Miyagi;Ippei Kasajima;Yumiko Tanaka;Keijiro Munakata;Kakon Nag;Naznin Sultana;Shigehisa Hirose and Nobuhiro Nakamura
通讯作者：
Shigehisa Hirose and Nobuhiro Nakamura