植物の金属輸送に関与するトランスポーターの同定

植物中参与金属运输的转运蛋白的鉴定

基本信息

批准号：
11F01089
负责人：
馬建鋒
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2012
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11F01089/
关键词：
金属輸送体欠乏転流イネオオムギトランスポーター

项目摘要

1.オオムギにおいて鉄欠乏によって誘導される二つのABCトランスポーター遺伝子(HvMRP1 and HvMRP2)の機能を解析するために、RNAi法を用いて、発現抑制株を作成した。それぞれの遺伝子について17の独立したラインを取得し、その発現レベルを定量RT-PCRで測定した。その結果、HvMRP1に関してはライン1と17、HvMRP1に関してはライン13の発現が野生型と比べ有意に低下していた。金属濃度を比較した結果、野生型とRNAiラインとの間に顕著な差が認められなかった。今後これらのラインを用いて、他の形質の変化を調べていきたい。2.OsYSL16はyellow-stripe likeファミリーに属する輸送体である。OsYSL16は主に節の飾部及び葉身の維管束に局在する。また細胞内局在を調べたところ、細胞膜に局在していた。さらに酵母では、銅―ニコチアナミン錯体の輸送活性を示した。OsYSL16遺伝子を破壊すると、古い葉の銅が増加し、新葉の銅が減少した。安定同位体65Cuを用いてラベリング実験を行った結果、古い葉から新葉への移動、止葉から種子への移動が破壊株で減少していた。これらの結果はOsYSL16が銅の鯖部の転流において重要な役割を果たしていることを示している。3.OsENA1はmajor facilitator superfamily (MFS)に属する輸送体である。OsENA1は主に根で発現し、鉄欠乏によって強く誘導された。また発現量の日周性が見られなかった。Tos-17挿入破壊株を用いて解析した結果、破壊株で亜鉛の集積が見られ、OsENA1が亜鉛の恒常性に関与している可能性があることを見出した。しかし、鉄欠乏及び十分条件下で破壊株と野生型の顕著な違いは見られなかった。今後、輸送活性の再測定などを行い、その遺伝子の機能を明らかにしたい。

1.为了分析大麦缺铁诱导的两个ABC转运蛋白基因(HvMRP1和HvMRP2)的功能，我们利用RNAi方法创建了表达抑制系。每个基因获得了 17 个独立的品系，并通过定量 RT-PCR 测量了它们的表达水平。结果，与野生型相比，1系和17系中的HvMRP1以及13系中的HvMRP1的表达显着降低。金属浓度的比较显示野生型和RNAi系之间没有显着差异。将来，我想用这些线来研究其他性状的变化。 2.OsYSL16是属于黄条样家族的转运蛋白。 OsYSL16 主要定位于节的装饰部分和叶片的维管束。此外，当研究细胞内定位时，发现它定位于细胞膜中。此外，酵母显示出铜-烟酰胺复合物的转运活性。破坏 OsYSL16 基因会增加老叶中的铜含量，并减少新叶中的铜含量。使用稳定同位素 65Cu 的标记实验表明，在受到破坏的植物中，从老叶到新叶以及从旗叶到种子的运动减少了。这些结果表明OsYSL16在铜的Sababe易位中发挥重要作用。 3.OsENA1是属于主要促进子超家族(MFS)的转运蛋白。 OsENA1 主要在根部表达，缺铁时强烈诱导表达。此外，没有观察到表达的昼夜模式。使用Tos-17插入破坏菌株进行分析的结果是，在破坏菌株中观察到锌积累，这表明OsENA1可能参与锌稳态。然而，在缺铁和铁充足的条件下，破坏菌株和野生型之间没有观察到显着差异。将来，我们希望重新测量转运活性并阐明该基因的功能。