難治性疼痛におけるグリア細胞活性化の分子的基盤

顽固性疼痛中神经胶质细胞激活的分子基础

基本信息

批准号：
17689042
负责人：
津田誠
金额：
$ 18.8万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

正常動物の脊髄腔内ヘインターフェロンγ(IFNγ)を投与することで,脊髄ミクログリアの活性化および持続的なアロディニア(難治性疼痛様の痛み行動)が発現した.脊髄におけるIFN γ受容体(IFN γ R)の発現細胞をin situ hybridization法により検討したところ, IFN γ R mRNAはミクログリアに特異的に検出された.さらに,IFN γによるアロディニアは,ミクログリアの活性化を抑制するミノサイクリンによりほぼ完全に抑制された.したがって,IFN γはミクログリアに発現するIFN γ Rを刺激して,ミクログリアを活性化し,持続的なアロディニアを誘導することが示唆された.そこで,実際の難治性疼痛モデル(Chungモデル)におけるIFNγの役割を, IFN γ R欠損マウス(IFN γ R-KO)を用いて検討した.野生型マウスでは神経損傷後にアロディニアの発症およびミクログリア活性化が認められたが,IFNγR-KOでは両者とも著明に抑制されていた.以上の結果は,IFN γが難治性疼痛時におけるミクログリアの活性化因子として重要な役割を果たしている可能性を示唆している.P2×4受容体発現増加因子としてfibronectin(FN)を同定した.本年度は, FNによるP2×4発現増加分子メカニズムを明らかにすべく,Srcファミリーキナーゼ(SFK)に注目した.ミクログリア培養細胞において,Lynキナーゼが主なSFK分子であること,さらに脊髄における発現細胞もミクログリアに特異的であることを明らかにした.さらに,Chungモデルの脊髄では, Lynの発現がミクログリア特異的に増加した.Lynの役割を検討するため, Lyn欠損マウス(Lyn-KO)を用いた.野生型マウスでは神経損傷後にアロディニアの発症およびP2×4の発現増加が認められたがLyn-KOでは両者とも有意に抑制されていた.さらに,Lyn-KOミクログリア培養細胞では, FNによるP2×4発現増加が完全に抑制されていた.以上の結果から,Lynは難治性疼痛時のP2×4発現増加に必須な細胞内シグナル分子であることが示唆された.

对正常动物进行椎管内注射干扰素 γ (IFN γ) 会导致脊髓小胶质细胞激活和持续性异常性疼痛（顽固性疼痛样疼痛行为），当通过原位杂交检查表达 IFN γ R 的细胞时，检测到 IFN γ R mRNA。特别是在小胶质细胞中。 γ 诱导的异常性疼痛几乎完全被米诺环素抑制，米诺环素抑制小胶质细胞的活化，因此，IFN γ 刺激小胶质细胞中表达的 IFN γ R，激活小胶质细胞，并诱导持续的异常性疼痛。因此，我们研究了 IFN γ 在实际顽固性疼痛模型中的作用。（Chung模型）使用IFNγR缺陷小鼠（IFNγR缺陷小鼠）。在野生型小鼠神经损伤后观察到异常性疼痛和小胶质细胞激活的发生，但两者在 IFNγR-KO 中均受到显着抑制，这表明 γ 可能在顽固性疼痛期间作为小胶质细胞激活剂发挥重要作用。 FN）作为增加 P2×4 受体表达的因子。为了阐明FN增加P2×4表达的分子机制，我们重点关注Src家族激酶（SFK），我们发现Lyn激酶是培养的小胶质细胞中的主要SFK分子，并且在脊髓中表达细胞。也是小胶质细胞特异性的。此外，在 Chung 模型的脊髓中，Lyn 表达在小胶质细胞中特异性增加。为了研究 Lyn 的作用，使用 Lyn 缺陷小鼠（Lyn-KO），在神经损伤后观察到异常性疼痛的发作和 P2×4 表达的增加，但在 Lyn-KO -In 培养的小胶质细胞中，这两种情况均受到显着抑制。细胞中，FN诱导的P2×4表达的增加被完全抑制。从以上结果表明，Lyn是顽固性疼痛期间增加P2×4表达的重要细胞内信号分子。