抗酸化物質としての母乳の役割

母乳作为抗氧化剂的作用

• 批准号: 16790592
• 负责人: 東海林 宏道
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790592/
• 关键词: 抗酸化作用; 母乳; heat shock protein; スペルミン

【目的】Heat shock protein(HSP)は様々なストレスにより産生が誘導され、細胞を保護する機能を担っており、抗酸化作用を有するとされる。我々は過去の本学会において、母乳もしくは母乳中の生理活性物質の一つであるポリアミン(スペルミン:SPM)が消化管上皮において抗酸化作用を発揮していることを報告した。今回、母乳やSPMの持つ抗酸化作用の機序にHSPの誘導が関与しているとの仮説に基づき、消化管上皮細胞がHSPを産生し抗酸化作用を発揮するか、さらに母乳もしくはSPMによる前処理によって細胞内にHSPの一つであるHSP72が誘導されるか否かを培養細胞を用いて検討した。【方法】(実験1)ラット小腸上皮由来IEC-6細胞をconfluentまで培養後、day4にheat shock(43℃、60分)処理を施し、day5に0.25mMの過酸化水素を30分間作用させ、生存細胞の割合をneutral red uptake法により評価した。(実験2)day4にheat shock処理、もしくは無血清培地+母乳(100倍希釈除脂肪処理)及び5μM SPMで24時間前処理をしたIEC-6綱胞内のHSP72発現の有無をWestern Blot法にて検討した。【結果】(実験1)Heat shock処理を施したIEC-6細胞(69.0%)では無処理の対照(47.0%)に比べ過酸化水素負荷後の生存細胞が有意に多かった。(実験2)Heat shock処理をしたIEC-6細胞にHSP72の発現を認めたが、母乳または5μM SPMによる前処理では細胞内にHSP72の発現を認めなかった。【結語】Heat shockによりIEC-6細胞内にHSP72が誘導され、抗酸化作用を発揮することが示唆された。しかし、母乳やSPMが消化管上皮細胞においてHSP72を誘導するという事実は確認できなかった。

[目的] 热休克蛋白（HSP）由各种应激产生，发挥保护细胞的作用，据说还具有抗氧化作用。在过去的一次会议上，我们报道了母乳或多胺（精胺：SPM），母乳中的一种生理活性物质，对胃肠道上皮发挥抗氧化作用。这次，基于HSP的诱导与母乳和SPM的抗氧化作用机制有关的假设，我们利用培养细胞研究了胃肠道上皮细胞是否产生HSP并发挥抗氧化作用。通过预处理在细胞内诱导HSP。 [方法](实验1)大鼠小肠上皮来源的IEC-6细胞培养至汇合后，第4天进行热休克处理(43℃，60分钟)，并用0.25mM过氧化氢处理30分钟第5天。通过中性红摄取法评估活细胞的百分比。 (实验2)采用Western Blot法测定经热休克处理或无血清培养基+母乳(100倍稀释脱脂处理)和5μM SPM预处理的IEC-6细胞中HSP72表达的有无第4天我考虑了24小时。 [结果]（实验1）过氧化氢负载后，经热休克处理的IEC-6细胞（69.0%）比未处理的对照组（47.0%）明显有更多的活细胞。 (实验2) 在经热休克处理的IEC-6细胞中观察到HSP72的表达，但在用母乳或5μM SPM预处理后的细胞中未观察到HSP72的表达。 [结论]热休克在IEC-6细胞中诱导HSP72，提示其发挥抗氧化作用。然而，尚不能证实母乳或SPM诱导胃肠上皮细胞中HSP72。